[發明專利]熱激活延遲熒光(TADF)納米探針及其制備方法和在生物成像中的應用

有效

• 申請號: 201811325113.3
• 申請日: 2018-11-08
• 公開（公告）號: CN109456250B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 彭海生;胡海宇;張青揚;杜智敏;張長梅;王慶華;許勝男;陳重;李明慧;劉肖瑩
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: C07D209/48
• 分類號: C07D209/48;C07F9/6558;C09K11/02;C09K11/06;G01N21/64;A61K49/00
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;馬鑫

1.一種如式Ⅰ所示的化合物或其可接受的鹽：

所述的化合物選自以下化合物中的一種：

2.權利要求1所述的化合物或其可接受的鹽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

a)DF-2的合成

(1)化合物a與對氨基苯乙酸以乙酸作溶劑，4℃條件下反應得到化合物c；

(2)化合物c、咔唑與NaH，以DMF作溶劑，0℃條件下反應得到化合物d；

(3)化合物d、N-(2-氨基乙基)嗎啉、HATU與DIPEA，以DMF作溶劑，室溫條件下反應得到化合物DF-2；

b)DF-3的合成

(1)化合物d、[2-(2-氨基乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯、HATU與DIPEA，以DMF作溶劑，室溫條件下反應得到化合物e；

(2)化合物e以TFA作溶劑，室溫條件下被還原得到化合物f；

(3)化合物f、2-羧乙基三苯基溴化磷、HATU與DIPEA，以DMF作溶劑，室溫條件下反應得到化合物DF-3。

3.化合物DF-1或權利要求1所述的化合物或其可接受的鹽在制備熱激活延遲熒光納米探針中的用途；

4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述的熱激活延遲熒光納米探針的劑型為膠束、脂質體或包合物。

5.一種熱激活延遲熒光納米探針膠束，其特征在于，由化合物DF-1或權利要求1所述的化合物或其可接受的鹽以及共聚物DSPE-PEG制備而成；

6.如權利要求5所述的熱激活延遲熒光納米探針膠束，其特征在于，所述的DSPE-PEG獨立地表示為DSPE-PEG600、DSPE-PEG2000、DSPE-PEG3000。

7.一種制備權利要求5或6所述的熱激活延遲熒光納米探針膠束方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將化合物DF-1或權利要求1所述的化合物或其可接受的鹽及共聚物DSPE-PEG分別溶于四氫呋喃，移入旋瓶，超聲數秒均勻混合，安裝旋瓶，旋轉5分鐘，可見均勻淡黃色螺紋式薄膜；

(2)超聲水化2分鐘，形成透明淡黃色液體，置入搖箱孵育1-2小時后移入EP管，離心，取上清液，過膜，于4℃條件保存，即為熱激活延遲熒光納米探針膠束。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟(1)中將化合物DF-1或權利要求1所述的化合物或其可接受的鹽及共聚物DSPE-PEG2000分別溶于四氫呋喃，配制成1mg/ml的溶液，將1ml DSPE-PEG2000和90μl化合物溶液移入旋瓶，超聲數秒均勻混合；安裝旋瓶，調試水浴鍋36℃；壓力0.65mp，旋轉5min，取下旋瓶加入2ml四氫呋喃再旋干一次，可見均勻淡黃色螺紋式薄膜。

9.如權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟(2)中水化過程包括：取下旋瓶，加入1-2ml雙蒸水搖勻，超聲水化2min，可見透明淡黃色液體；移入搖箱，37℃，110rpm，孵育1-2小時移入EP管，20000rpm，離心5min，取上清液，過220μm膜三次，過100μm膜三次，于4℃條件保存。

10.權利要求5或6所述的熱激活延遲熒光納米探針膠束在制備細胞或活體水平檢測與成像試劑中的應用。

11.如權利要求10所述的應用，其特征在于，所述的細胞為HePG2細胞或Hela細胞。