[發(fā)明專利]一種植物揮發(fā)油抑制黃曲霉菌

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811321629.0
• 申請日: 2018-11-07
• 公開（公告）號: CN111149817A
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李婷;劉春生;姜丹
• 申請（專利權(quán)）人: 劉春生
• 主分類號: A01N65/36
• 分類號: A01N65/36;A01P3/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種植物揮發(fā)油抑制黃曲霉菌本發(fā)明公開一種植物揮發(fā)油，用于抑制黃曲霉菌，所屬領(lǐng)域?yàn)檎婢种祁I(lǐng)域，所涉及的植物為竹葉花椒(Zanthoxylum armatum DC)。采用水蒸氣蒸餾法從竹葉花椒中獲得揮發(fā)油，在密閉空間采用濾紙片擴(kuò)散法對黃曲霉菌孢子及菌絲體進(jìn)行熏蒸，能有效抑制黃曲霉菌的生長及繁殖。本發(fā)明能經(jīng)濟(jì)、安全、有效抑制黃曲霉菌的生長進(jìn)而減緩黃曲霉毒素的產(chǎn)生，適用于大規(guī)模中藥材、農(nóng)產(chǎn)品貯存，具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及真菌抑制領(lǐng)域。

背景技術(shù)

目前，世界范圍內(nèi)對中藥材的需求日益增多，潛在的中藥材安全隱患也日漸突出。中藥材中黃曲霉菌及其毒素污染問題已成為阻礙中醫(yī)藥發(fā)展的一個重要因素，其根本會影響人類生命健康。黃曲霉菌是一種真菌，在自然界中到處可見到黃曲霉菌的分布。在中藥材的種植、采收、加工、儲藏及其運(yùn)輸過程中很容易受到真菌污染。一定量的黃曲霉菌會產(chǎn)生黃曲霉毒素，目前黃曲霉毒素已被分離包括b1、 b2、g1、g2、m1、m2等十幾種類型。其中，AFb1已被國際癌癥機(jī)構(gòu)劃分為一類致癌物，會造成致畸、致癌和免疫抑制等結(jié)果。黃曲霉毒素能破壞人及動物肝臟組織的損壞，嚴(yán)重時可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。目前，諸多方法被應(yīng)用于減少或抑制黃曲霉毒素過程中，但少有方法能在實(shí)際應(yīng)用中大規(guī)模推廣。解決黃曲霉毒素污染問題應(yīng)從源頭殺死或抑制黃曲霉菌的生長。因此，本發(fā)明涉及一種植物揮發(fā)油抑制黃曲霉菌。

發(fā)明內(nèi)容

竹葉花椒(ZanthoxylumarmatumDC)揮發(fā)油抑制黃曲霉菌的生長及繁殖

具體實(shí)施方式：

1.竹葉花椒揮發(fā)油的提取 取竹葉花椒20g放入圓底燒瓶，加入約10倍量去離子水水蒸氣蒸餾4h，得到淡黃白色油狀物2.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的制備 取200g馬鈴薯洗凈去皮，切成約1×1cm小塊，加去離子水煮沸30min，八層紗布過濾取濾液，加入瓊脂20g，葡萄糖20g，微微加熱攪拌至均勻，稍冷卻后補(bǔ)足水至1000mL，分裝滅菌，取出倒入無菌培養(yǎng)皿中冷卻備用。3.竹葉花椒揮發(fā)油密閉熏蒸黃曲霉菌 3.1在超凈臺中，在附有黃曲霉菌株的培養(yǎng)基表面加入適量無菌水洗滌，無菌紗布過濾取孢子液，采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)調(diào)節(jié)孢子液濃度到2×10^-7，制得后期實(shí)驗(yàn)所需的黃曲霉菌孢子液。3.2 用移液槍取黃曲霉菌孢子懸浮液400μL，均勻涂布在培養(yǎng)基上。培養(yǎng)皿上蓋中心固定無菌圓形濾紙片(直徑1cm)，移液槍移取100μL竹葉花椒揮發(fā)油在濾紙片中心位置，迅速將接種的培養(yǎng)皿扣在含有精油的培養(yǎng)皿上蓋，封口膜密封，移入霉菌培養(yǎng)箱，28℃培養(yǎng)。未加入竹葉花椒揮發(fā)油的培養(yǎng)基做空白。3.3用接種針挑取黃曲霉菌菌絲體適量接種在培養(yǎng)基中心。培養(yǎng)皿上蓋中心固定無菌圓形濾紙片(直徑1cm)，移液槍移取100μL竹葉花椒揮發(fā)油在濾紙片中心位置，迅速將接種的培養(yǎng)皿扣在含有精油的培養(yǎng)皿上蓋，封口膜密封，移入霉菌培養(yǎng)箱，28℃培養(yǎng)。未加入竹葉花椒揮發(fā)油的培養(yǎng)基做空白。4.竹葉花椒揮發(fā)油抑制黃曲霉菌 涂布孢子液與接種黃曲霉菌絲體的培養(yǎng)基在加入竹葉花椒揮發(fā)油后的一個月內(nèi)均無黃曲霉菌的生長。