[發(fā)明專利]一種檢測癌胚抗原的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器及其制備方法和使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811313546.7
• 申請(qǐng)日: 2018-11-06
• 公開（公告）號(hào): CN109507256B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韋秀華;王軍梅;郝遠(yuǎn)強(qiáng);張銀堂;瞿鵬;徐茂田
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 商丘師范學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N27/327
• 分類號(hào): G01N27/327
• 代理公司: 鄭州優(yōu)盾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125
• 代理人: 張真真

本發(fā)明屬于功能性納米材料與適配體傳感器技術(shù)領(lǐng)域，特別是指一種檢測癌胚抗原的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器及其制備方法和使用方法。所述無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器通過將Au/Ag合金附著在g?C₃N₄二維納米片形成Au?Ag/g?C₃N₄納米復(fù)合材料，以Au?Ag/g?C₃N₄納米復(fù)合材料作為基底修飾玻碳電極，然后將癌胚抗原適配體通過Au?S和Ag?S共價(jià)健與Au?Ag/g?C₃N₄納米復(fù)合材料結(jié)合，即得檢測癌胚抗原的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器。本發(fā)明所述的癌胚抗原適配體傳感器特異性好、檢測范圍寬、靈敏度高、檢測速度快并可以用于血清實(shí)際樣品的檢測，最低檢出限0.32 fg/mL。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于功能性納米材料與適配體傳感器技術(shù)領(lǐng)域，特別是指一種檢測癌胚抗原的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器及其制備方法和使用方法。

背景技術(shù)

癌胚抗原(CEA)是一種具有人類胚胎抗原特性的酸性糖蛋白，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物，對(duì)于惡性腫瘤的鑒別診斷、病情監(jiān)測、療效評(píng)價(jià)等方面有重要的臨床價(jià)值。常見的檢測癌胚抗原的方法有熒光免疫分析法(FIA)、酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)等，但是這些方法存在一些不足，如線性范圍窄、生物酶容易失活等。因此，需要發(fā)明一種特異性好、檢測范圍寬、穩(wěn)定性好、成本低的檢測癌胚抗原的方法。

電化學(xué)發(fā)光(ECL)是指物質(zhì)在電極上經(jīng)歷了高能量的電子轉(zhuǎn)移后形成激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定又迅速回到基態(tài)并產(chǎn)生光信號(hào)。由于電化學(xué)發(fā)光靈敏度高、檢測迅速、背景噪音低、儀器操作簡單等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于諸多領(lǐng)域。電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器由于特異性好、靈敏度高、檢測速度快等特點(diǎn)，廣泛的應(yīng)用于生物、食品、環(huán)境、免疫等方面的分析。

合金納米材料的催化性能、光學(xué)性能、電子傳遞性能均優(yōu)于單金屬納米材料，金和銀由于極易形成合金而被廣泛的應(yīng)用。g-C₃N₄納米片是一種非金屬半導(dǎo)體納米材料，具有卓越的催化性能、光學(xué)性能和電子傳遞性能，并且是一種新型的、有效的、穩(wěn)定的電化學(xué)發(fā)光材料。Au-Ag/g-C₃N₄復(fù)合納米材料表面積大、電子傳遞效率高、容易和多種生物分子結(jié)合等優(yōu)點(diǎn)，可被用作生物適配體傳感器的基底材料。

Luminol-H₂O₂是一種傳統(tǒng)的電化學(xué)發(fā)光體系，Luminol發(fā)光效率高、無毒、成本低廉并且化學(xué)穩(wěn)定性好，所以被廣泛的應(yīng)用于電化學(xué)發(fā)光生物檢測。將Au-Ag/g-C₃N₄合金復(fù)合納米材料運(yùn)用到該發(fā)明中能夠增強(qiáng)對(duì)癌胚抗原檢測的線性范圍和靈敏度。

本發(fā)明使用Au-Ag/g-C₃N₄復(fù)合納米材料做為基底用來增強(qiáng)玻碳電極的導(dǎo)電性和固定癌胚抗原適配體，進(jìn)一步修飾上癌胚抗原后會(huì)猝滅luminol的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)癌胚抗原的特異性檢測。本發(fā)明構(gòu)建的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器在檢測癌胚抗原時(shí)具有特異性好、檢測范圍寬、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提出一種檢測癌胚抗原的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器及其制備方法和使用方法，Au-Ag/g-C₃N₄復(fù)合納米材料做為基底用來增強(qiáng)玻碳電極的導(dǎo)電性和固定癌胚抗原適配體，進(jìn)一步修飾上癌胚抗原后會(huì)猝滅luminol的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)癌胚抗原的特異性檢測，本發(fā)明構(gòu)建的無標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光適配體傳感器在檢測癌胚抗原的最低檢測限為檢出限0.32 fg/mL。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：