[發(fā)明專利]亞胺還原酶突變體及其在光學活性1-取代-四氫異喹啉衍生物合成中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811313231.2 | 申請日： | 2018-11-06 |
| 公開（公告）號： | CN109355266B | 公開（公告）日： | 2020-11-27 |
| 發(fā)明（設計）人： | 鄭高偉;李昊;許建和;錢小龍;潘江 | 申請（專利權）人： | 華東理工大學;蘇州百福安酶技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/06 | 分類號： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12 |
| 代理公司： | 上海科盛知識產權代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明偉 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 亞胺 還原酶 突變體 及其 光學 活性 取代 四氫異 喹啉 衍生物 合成 中的 應用 | ||
1.一種亞胺還原酶突變體，其特征在于：所述亞胺還原酶突變體的氨基酸序列為如下序列中的一種：
(1) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸；
(2) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、谷氨酸或精氨酸；
(3) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為丙氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、蘇氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、纈氨酸或亮氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、谷氨酸或精氨酸。
2.根據(jù)權利要求1所述亞胺還原酶突變體，其特征在于，所述亞胺還原酶突變體的氨基酸序列為如下序列中的一種：
(1) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸；
(2) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(3) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為蘇氨酸；
(4) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為纈氨酸；
(5) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為谷氨酸；
(6) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為精氨酸；
(7) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為丙氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(8) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為絲氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(9) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為半胱氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(10) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為蘇氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(11) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為甲硫氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(12) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為異亮氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(13) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為纈氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸；
(14) 將如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第123位蘇氨酸替換為異亮氨酸，第178位苯丙氨酸替換為亮氨酸，第228位甘氨酸替換為丙氨酸。
3.一種分離的核酸，其特征在于：所述核酸編碼如權利要求1或2所述亞胺還原酶突變體。
4.一種包含如權利要求3所述核酸的重組表達載體。
5.一種包含如權利要求4所述重組表達載體的重組表達轉化體。
6.一種亞胺還原酶突變體的制備方法，其特征在于：培養(yǎng)如權利要求5所述重組表達轉化體，從培養(yǎng)物中獲得亞胺還原酶突變體。
7.如權利要求1或2所述亞胺還原酶突變體在催化1-取代-二氫異喹啉衍生物不對稱還原合成光學活性1-取代-四氫異喹啉衍生物中的應用。
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