[發(fā)明專利]一種提高薯蕷皂苷元含量的黃姜培育方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811309049.X
• 申請日: 2018-11-05
• 公開（公告）號: CN109392709A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋兆霞
• 申請（專利權(quán)）人: 宋兆霞
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G22/25;A01G24/15;A01G24/28;A01G24/10;A01G24/25;A01G24/30;A01H1/02
• 代理公司: 長沙新裕知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 43210
• 代理人: 趙登高

1.一種提高薯蕷皂苷元含量的黃姜培育方法，其特征在于：該培育方法的詳細步驟如下：

1）培育材料的優(yōu)選：選擇黃姜優(yōu)良種質(zhì)資源作為培育材料，并挑選田間生長健壯、無病害的雄性單株采集花蕾；

2）花蕾前處理與表面消毒：在黃姜的盛花期，上午10點前采集雄性單株上的花蕾，并從中篩選出小孢子發(fā)育時期處于單核靠邊期的花蕾，洗凈后用濕紗布包裹裝于培養(yǎng)皿中，在4℃冰箱放置3~5d，然后將花蕾取出，在室溫下用超聲波處理30min；接下來對處理后的花蕾進行表面消毒：先用75%乙醇消毒60s，蒸餾水沖洗1~2次，再用1.5%次氯酸鈉消毒20~30min，蒸餾水沖洗3~4次，用濾紙吸干花蕾表面的水分；

3）花藥接種與誘導：在無菌工作臺上，用解剖針和鑷子從上述處理后的花蕾中剝離出花藥，接種在誘導培養(yǎng)基上，在溫度26~28℃、避光的條件下培養(yǎng)28~35d誘導出愈傷組織；

4）愈傷組織分化：當誘導出的愈傷組織長到1.5~2.5cm后，將其轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，先在溫度26~28℃、光照強度800~l200lx、光照時間9~11h/d的條件下培養(yǎng)7d，再在溫度24~26℃、光照強度2000~2500lx、光照時間11~13h/d的條件下進行培養(yǎng)，每25d左右繼代1次，直至愈傷組織分化成幼苗；

5）幼苗生根：將高度在3cm左右的幼苗單株切下接種到生根培養(yǎng)基上，在溫度24~26℃、光照強度2500~3000lx、光照時間11~13h/d的條件下培養(yǎng)25~30d，幼苗長出旺盛的根系，形成完整的花培再生植株；

6）植株倍性鑒定，篩選出二倍體花培再生植株：運用流式細胞儀技術(shù)對花培再生植株進行倍性鑒定，以黃姜正常二倍體植株（2n=2x=20）作為參照，篩選出花培再生植株中的二倍體植株；

7）馴化后大田定植：將篩選出的二倍體植株移栽到裝有栽培基質(zhì)的育苗杯中，放入溫室，在溫度20~30℃、相對濕度70~80%、自然光照的條件下馴化1個月，然后將其定植到大田里，進行常規(guī)田間管理；

8）將黃姜超雄株和雌株進行雜交，獲得雄性新品系：等到大田定植的黃姜二倍體植株生長發(fā)育進入花期，根據(jù)開花特性辨別出超雄株和雌株，將二者進行人工雜交授粉，收獲的雜交F1代種子即為雄性新品系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高薯蕷皂苷元含量的黃姜培育方法，其特征在于，所述步驟2）中篩選出小孢子發(fā)育時期處于單核靠邊期的花蕾的方法為：挑取花蕾中的花藥于載玻片上，滴一滴卡寶品紅溶液染色，用鑷子將花藥搗碎使其散出花粉小孢子，然后移去花藥壁殘渣，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察小孢子的發(fā)育時期。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高薯蕷皂苷元含量的黃姜培育方法，其特征在于，所述步驟2）中超聲波處理的頻率為40KHz，功率為200W。