[發明專利]一種低分子肝素的純化方法

有效

• 申請號: 201811308059.1
• 申請日: 2018-11-05
• 公開（公告）號: CN109575156B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 蔣建華;張亮;王棟;邢嶺;蔣大圓
• 申請（專利權）人: 上海寶維醫藥技術有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 上海海貝律師事務所 31301
• 代理人: 范海燕

本發明公開了一種低分子肝素的純化方法，將待純化的低分子肝素溶解于純化水中，加入陽離子交換樹脂，形成混合液；攪拌形成的混合液，每隔固定的時間檢測混合液pH值，直到pH值穩定，再繼續攪拌半個小時；對攪拌液進行過濾，利用堿性物質將調節pH值至6?8之間；進行濃縮；冷凍干燥，得到低分子肝素成品，本發明的技術原理是利用陽離子交換樹脂吸附去低分子肝素中的糖絲氨酸和其他陽離子，如銨根或季銨離子和鐵、鎂等金屬離子等，以獲得穩定性高的低分子肝素，使用本發明的純化方法生產低分子肝素，穩定性好，可長期存放，而且收率極高。

技術領域

本發明涉及化工技術領域，具體為一種低分子肝素的純化方法。

背景技術

自二十世紀三十年代起，普通肝素(UFH)就被用于血栓的預防和治療。普通肝素是不同長度和分子量的硫酸粘多糖的混合物。隨著分子大小的不同，其抗凝效果和藥理學特性也有所差異。肝素主要來自于豬的小腸以及牛的肺組織。

低分子肝素(low-molecular-weight heparin，LMWH)是一類以普通肝素為起始物料經過分級或降解而得到的具有較低分子量的低聚糖混合物，它具有抗Xa活性，可抑制體內、體外血栓和動靜脈血栓的形成，但不影響血小板聚集和纖維蛋白原與血小板的結合。低分子肝素最早于八十年代在歐洲應用于臨床，由于在臨床使用中具有比較明顯的優勢，如臨床應用出血風險比普通肝素更低，LMWH逐漸取代了普通肝素的很多適應癥，成為治療或預防急性靜脈血栓、急性冠脈綜合癥(心絞痛、心肌梗塞)等疾病的首選藥物。

通過不同的解聚方法制成的不同品種的LMWHs，其藥物動力學特性和抗凝活性有不同程度的差異，適應癥也各不相同，在臨床上不能相互代替，因此每種產品都可被認為是獨一無二的。目前世界各地在用的LMWHs有：依諾肝素鈉(enoxaparin),達肝素鈉(dalteparin),那屈肝素鈣(nadroparin),亭扎肝素鈉(tinzaparin),舍托肝素鈉(certoparin),瑞肝素鈉(reviparin)，帕肝素鈉(parnaparin)以及貝米肝素鈉(bemiparin)等。

肝素和低分子肝素本身是穩定的，但由于普通肝素含有一定量的糖絲氨酸(glycoserine)和蛋白質，這類雜質在由普通肝素解聚制備的低分子肝素等肝素衍生產品中始終存在，由于含氨基物質的存在，低分子肝素原料和制劑的保存過程中，會發生復雜的美拉德反應(Maillard reaction)，美拉德反應又稱為“非酶棕色化反應”，這是肝素類藥品儲存中發生顏色變化的主要原因之一，肝素類藥品一旦發生顏色變化，將不能用于注射等醫療用途。法國賽諾菲-安萬特公司專利EP1582531A1描述了一種通過強氧化劑消除糖絲氨酸的方法，但該方法反應條件劇烈，且易引入新雜質，存在明顯的缺陷。

發明內容

針對背景技術中存在的問題，本發明提供了一種低分子肝素的純化方法，采用易于工業化的方法，解決低分子肝素類藥品的穩定性差的問題，尤其是變色問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種低分子肝素的純化方法，包括以下步驟：

①、混合液制備：將待純化的低分子肝素溶解于純化水中，使得低分子肝素的濃度為1-8％(w/v)，加入陽離子交換樹脂，形成混合液；

②、攪拌：攪拌由步驟①形成的混合液，每隔固定的時間檢測混合液pH值，直到pH值穩定，再繼續攪拌半個小時；

③、過濾：對步驟②的攪拌液進行過濾，利用堿性物質將調節pH值至6-8之間；

④、濃縮：對由步驟③得到的過濾液進行濃縮，濃縮濃度為12-20％，利用孔徑為0.22微米的纖維素濾膜進行二級過濾；

⑤、冷凍干燥：對由步驟④得到的溶液進行冷凍干燥，得到低分子肝素成品。