[發明專利]一種制備人參稀有皂苷Rk3

有效

• 申請號: 201811301790.1
• 申請日: 2018-11-02
• 公開（公告）號: CN109439718B
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: 邱智東;徐偉;董雪蓮
• 申請（專利權）人: 長春中醫藥大學
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C12R1/645
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 劉猛;趙青朵

本發明涉及生物工程技術領域，公開了一種制備人參稀有皂苷Rk₃的方法。本發明所述方法先制備冬蟲夏草種子液，然后接種至滅菌后的原人參藥材上培養至長滿菌絲，將長滿菌絲的原人參藥材取出，干燥，獲得含有人參稀有皂苷Rk₃的初級產物，分離純化初級產物獲得人參稀有皂苷Rk₃。本發明將藥用真菌冬蟲夏草與原人參藥材聯合發酵生產人參皂苷Rk₃，由此確定了能夠制備高含量人參皂苷Rk₃的簡便工藝，相比原人參藥材中人參皂苷Rk₃含量提高了22倍。本發明方法能有效直接利用原人參藥材，減少前期提取純化步驟，反應條件溫和可控，Rk₃產量大，純度高。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及一種制備人參稀有皂苷Rk₃的方法。

背景技術

人參(Panax ginseng C.A.Meyer)為五加科多年生草本植物人參的根，自古有“百草之王”之稱。人參的化學成分主要為人參皂苷、人參多糖等，成分復雜，生物活性廣泛，藥理作用獨特，具有抗癌和抗腫瘤，調節中樞神經系統及心腦血管，改善消化系統促進代謝，提高免疫力，抗衰老以及益智等功效。

現今藥理研究表明，人參稀有皂苷Rk₃對肝癌細胞有明顯抑制作用，也可用于防治血管新生疾病，并對毛細血管擴張癥也有較好療效，然而原人參中人參稀有皂苷Rk₃含量很低，且因其結構比較復雜，利用現有的科學技術無法實現化學上的全合成，目前制備人參稀有皂苷Rk₃的方法多為化學高溫高壓裂解法、普通分離純化法和人參三醇型皂苷生物轉化法。但是，化學高溫高壓裂解法反應復雜、副反應多、反應條件難以控制；普通分離純化法，提取效率低，無法得到大量人參稀有皂苷Rk₃；人參三醇型皂苷生物轉化法，底物成本高，對人參總皂苷利用率低。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種制備人參稀有皂苷Rk₃的方法，使得所述方法能夠以原人參藥材為原料，獲得高含量的人參稀有皂苷Rk₃。

為了實現上述發明目的，本發明提供了如下技術方案：

一種制備人參稀有皂苷Rk₃的方法，制備冬蟲夏草種子液，然后接種至滅菌后的原人參藥材上培養至長滿菌絲(培養瓶瓶底長滿菌絲)，將長滿菌絲的原人參藥材取出，干燥，獲得含有人參稀有皂苷Rk₃的初級產物，分離純化初級產物獲得人參稀有皂苷Rk₃。

作為優選，所述制備冬蟲夏草種子液為：

在菌種培養基中接種冬蟲夏草菌種，恒溫振蕩培養至種子液渾濁黏稠呈淡黃色。其中，所述菌種培養基配方為：

葡萄糖1.9-2.1％，KH₂PO₄0.09-0.11％，MgSO₄0.09-0.11％，蛋白胨 0.45-0.55％，酵母粉0.18-0.22％，維生素B₁ 0.09-0.11％，余量水，pH自然(％為質量百分比)；

在本發明具體實施方式中，所述菌種培養基配方為：

葡萄糖2％，KH₂PO₄ 0.1％，MgSO₄ 0.1％，蛋白胨0.5％，酵母粉0.2％，維生素B₁0.1％，pH自然；

所述恒溫振蕩培養的條件優選為：150r/min，26±1℃，濕度60±1％。