[發(fā)明專利]一種可視化檢測(cè)阿莫西林的金納米顆粒探針、制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811299573.3
• 申請(qǐng)日: 2018-11-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109632661B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 藍(lán)敏煥;符燕召;黃麗;胥婷;邢雪健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/29
• 分類號(hào): G01N21/29;G01N21/33
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 談杰

1.一種可視化檢測(cè)阿莫西林的金納米顆粒探針，其特征在于，在所述探針的所述金納米顆粒上修飾有通過(guò)氫鍵相互作用、能夠特異性識(shí)別阿莫西林的哌嗪基團(tuán)；

所述探針為以下結(jié)構(gòu)：

其中，R1為

-S-R₃-X -S-R₃-SO₃H

-S-R₃-CO-X -S-R₃-CO-R₄

-S-S-R₃-X -S-S-R₃-SO₃H

中的一種；

R2為氫基、羥基、鹵素、酰基、醚基、磺酰基、烷基、取代烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、芳基、取代芳基、芳氧基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳雜環(huán)基、PEG基團(tuán)中的一種；

R3為氫基、烷基、取代烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、烷氧基、醚基、芳基、酰胺基、氨基、取代芳基、芳氧基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳雜環(huán)基、PEG基團(tuán)中的一種；R4為氫基、烷基、取代烷基、烯基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、烷氧基、醚基、芳基、取代芳基、芳氧基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、芳雜環(huán)基、PEG基團(tuán)中的一種；X為F、Cl、Br、I中的一種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可視化檢測(cè)阿莫西林的金納米顆粒探針，其特征在于，所述探針以金納米顆粒為基體，在金納米顆粒表面修飾上巰基羧酸類化合物，所述巰基羧酸類化合物的一端為巰基，一端為羧基，中間為連接基團(tuán)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可視化檢測(cè)阿莫西林的金納米顆粒探針，其特征在于，所述巰基羧酸類化合物為巰基乙酸、2-巰基丙酸、3-巰基丙酸和2，3-二巰基丁二酸中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可視化檢測(cè)阿莫西林的金納米顆粒探針，其特征在于，所述探針中含所述哌嗪基團(tuán)的化合物為1-甲基哌嗪、1-乙基哌嗪、1-丙基哌嗪和1-異丙基哌嗪中的一種。

5.一種權(quán)利要求1-4中任一所述的金納米顆粒探針的制備方法，其特征在于，所述探針以金納米顆粒為基體，在金納米顆粒表面修飾有巰基羧酸類化合物，然后基于羧基和氨基的縮合反應(yīng)連接上哌嗪基團(tuán)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的金納米顆粒探針的制備方法，其特征在于，所述金納米顆粒表面修飾巰基乙酸和1-乙基哌嗪；所述制備方法包括以下步驟：

步驟1，AuNPs的制備：在250ml圓底燒瓶中加入125mL 1mM的HAuCl₄溶液，攪拌并升高油浴溫度至100-150℃下回流10～60min；將12.5mL 38mM的檸檬酸鈉溶液迅速加入到圓底燒瓶中，混合液在維持油浴溫度為100-150℃下再次回流10～60min；溶液顏色由淡黃色變?yōu)樽罱K酒紅色，停止加熱，將獲得的AuNPs溶液冷卻至室溫；

步驟2，TGA-AuNPs的制備：室溫下，將50ml制備好的AuNPs溶液加入圓底燒瓶中，攪拌下滴加100μL 20mM的巰基乙酸溶液，將混合液在室溫下攪拌8～12h；然后向混合液中加入50ml超純水，10000～12000rpm、25℃下離心20～30min；棄去上清液，以除去過(guò)量的檸檬酸鈉和巰基乙酸；將TGA-AuNPs重新分散在50ml超純水中，制備好的TGA-AuNPs溶液在4℃下儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?/p>

步驟3，Pz-TGA-AuNP的制備：在圓底燒瓶中加入50mL制備好的TGA-AuNPs溶液，100μL20mM的N-羥基琥珀酰亞胺，100μL 20mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，混合液在室溫下攪拌30～40min；然后加入PH＝7～8的PBS緩沖液和120μL 20mM的1-乙基哌嗪，混合液再次攪拌18～24h；然后向混合液中加入50ml超純水，10000～12000rpm、25℃下離心20～30min；棄去上清液，將Pz-TGA-AuNPs分散在50mL超純水中備用，制得金納米顆粒探針。