[發明專利]一種昆蟲病原線蟲活體培養方法在審
| 申請號： | 201811297687.4 | 申請日： | 2018-11-01 |
| 公開（公告）號： | CN109496989A | 公開（公告）日： | 2019-03-22 |
| 發明（設計）人： | 李小龍;張鳳琴;何農躍 | 申請（專利權）人： | 李小龍 |
| 主分類號： | A01K67/033 | 分類號： | A01K67/033 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重;馮振寧 |
| 地址： | 412007 湖*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 昆蟲病原線蟲 活體培養 大蠟螟 接種 浸泡式 齡幼蟲 恒溫箱培養 通氣培養 規模化 接種液 培養箱 幼蟲體 配制 通氣 自制 繁殖 矛盾 | ||
1.一種昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：具體步驟包括：
S1.接種液配制：按所需濃度要求，配制昆蟲病原線蟲濃度為1萬~5萬尾/ml的接種液；
S2.接種：將大蠟螟幼蟲浸泡入步驟S1所得昆蟲病原線蟲接種液中，當75~85%的大蠟螟假死不動時將大蠟螟取出；
S3.培養：將步驟S2所得浸泡后的活體大蠟螟幼蟲移入滅菌布上，恒溫恒濕培養；
S4.選檢：接種、培養后第5~7天，將體表面發霉、變黑和水腫的大蠟螟尸體檢出；
S5.收集：接種、培養后第10~15天時將選檢后剩余的大蠟螟尸體磨碎后浸泡于無菌水中，靜置分離，去上清液，收集下層沉淀液重復以上操作3~5次，合并沉淀物即收集得到昆蟲病原線蟲。
2.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S2中，大蠟螟與接種液中昆蟲病原線蟲數量比為1:1~5萬。
3.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S2所述浸泡時間為5~10min，接種液溫度為20~30℃，接種室溫度20~30℃。
4.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S3中，所述滅菌布平鋪于可疊加托盤內，托盤底部設置有多個均勻排布的貫通小孔。
5.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S3中，所述恒溫溫度為20~30℃；所述恒濕濕度為93~100%。
6.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S3培養過程中需不斷通入飽和水汽。
7.根據權利要求6所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：所述飽和水汽由氫氧化鈉溶液霧化而成，其中氫氧化鈉溶液中氫氧化鈉濃度為0.1~0.8‰。
8.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S5所述浸泡時間為30~60min，所述靜置時間為60~180min；重復以上操作次數3~5次，整個過程室溫控制在20~30℃。
9.根據權利要求1所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法，其特征在于：步驟S5所述磨碎后的大蠟螟尸體與無菌水的質量比1:1~4。
10.權利要求1~9任一項所述的昆蟲病原線蟲活體培養方法應用于小規模家庭培養、工業化大規模生產。
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