[發明專利]微生物發酵法高效制備2-氨基-1,3-丙二醇

有效

• 申請號: 201811296012.8
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109321610B
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發明（設計）人: 馮雁;羅玉常
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00;C07K19/00;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

1.一種生產2-氨基-1,3-丙二醇的方法，其特征在于，包括步驟：

（a）在適合發酵的條件下，培養工程菌，從而產生2-氨基-1,3-丙二醇；

（b）任選地從發酵產物中分離2-氨基-1,3-丙二醇；

所述工程菌具有以下特征：

（i）表達外源的磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶，并且所述磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的氨基酸序列從N端到C端的構成如式I所示：

A-B 式I

其中，

組件A是一種蛋白功能增強分子，其氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示；

組件B是野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶或其N端氨基酸序列的第1-345位、第1-383位、第1-499位或第1-801位，所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的序列如SEQ ID NO:1所示；和

（ii）任選地具有增強活性的谷氨酸脫氫酶；

（iii）具有增強活性的磷酸絲氨酸磷酸酶，所述磷酸絲氨酸磷酸酶是具有催化2-氨基-1,3-丙二醇磷酸進行去磷酸反應生成2-氨基-1,3-丙二醇的酶；

并且，所述發酵條件中，無甘油。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述工程菌為經改造的受體菌株，所述受體菌株選自下組：原核生物或真核生物。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述受體菌株為大腸桿菌HMS174(DE3)。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸脫氫酶的氨基酸序列如SEQ IDNO: 4所示。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸絲氨酸磷酸酶的氨基酸序列如SEQID NO: 5所示。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵條件中，氮源包括銨離子化合物。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述銨離子化合物為(NH₄)₂SO₄、(NH₄)₃PO₄或NH₄NO₃。

8.一種融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列從N端到C端的構成如式I所示：

A-B 式I

其中，

組件A是一種蛋白功能增強分子，其氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示；

組件B是野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶或其N端氨基酸序列的第1-345位、第1-383位、第1-499位或第1-801位，所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的序列如SEQ ID NO:1所示。

9.如權利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，所述組件B為所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的N端氨基酸序列的第1-499位，所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的序列如SEQ ID NO: 1所示。

10.如權利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，所述組件B為所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的N端氨基酸序列的第1-383位，所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的序列如SEQ ID NO: 1所示。

11.如權利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，所述組件B為所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的N端氨基酸序列的第1-345位，所述野生型磷酸二羥基丙酮氨基轉移酶的序列如SEQ ID NO: 1所示。

12.如權利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO: 3所示。