[發明專利]一種生長抑素免疫原復合物及其制備生長抑素抗獨特型卵黃抗體的方法

在審

• 申請號: 201811294986.2
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109306018A
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 黃威權;趙鋒;呂葆真;李丹;張恒博;張濤濤
• 申請（專利權）人: 西安德軒馳生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K16/42;C07K16/02;A61K39/395;A61P5/02
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

1.一種生長抑素免疫原復合物，包括蛋白質載體和生長抑素，所述生長抑素偶聯在所述蛋白質載體上；所述蛋白質載體和生長抑素的質量比為(8～13)：(0.6～1.5)。

2.根據權利要求1所述生長抑素免疫原復合物，其特征在于，所述蛋白質載體包括血清蛋白，所述血清蛋白的分子量大于10000Da。

3.權利要求1～2任一項所述生長抑素免疫原復合物的制備方法，包括：將載體蛋白與PBS緩沖液按照8～13mg：1mL的質量體積比混合，得載體蛋白液；將生長抑素與蒸餾水按照0.6～1.5mg：1mL的質量體積比混合，得生長抑素液；將所述載體蛋白液與所述生長抑素液等體積混合，所述混合時滴加戊二醛溶液，得生長抑素免疫原復合物；所述戊二醛溶液與所述載體蛋白液與所述生長抑素液的混合液的體積比為0.8～1.3：2；所述戊二醛溶液的體積分數為0.25％。

4.一種利用權利要求1～2任一項所述生長抑素免疫原復合物或利用權利要求3所述制備方法制備得到的生長抑素免疫原復合物制備生長抑素抗獨特型卵黃抗體的方法，包括以下步驟：1)將所述生長抑素免疫原復合物與不完全弗氏佐劑混合后免疫動物，采集免疫后動物的血清，得抗生長抑素抗血清；2)將步驟1)得到的所述抗生長抑素抗血清與不完全佐劑混合后免疫蛋雞，收集免疫后蛋雞所產的雞蛋，得抗獨特型抗體高免雞蛋；3)分離步驟2)得到的所述高免雞蛋的蛋黃，去除雜蛋白后得生長抑素抗獨特型卵黃抗體粗品；4)將步驟3)得到的所述生長抑素抗獨特型卵黃抗體粗品與酒精混合后，收集沉淀，得生長抑素抗獨特型卵黃抗體。

5.根據權利要求4所述方法，其特征在于，步驟1)所述免疫動物的方法包括：每次每只動物免疫5～40μg生長抑素免疫原復合物與不完全弗氏佐劑的混合物；所述免疫的次數為3～4次，每次免疫的間隔為7～10天。

6.根據權利要求4所述方法，其特征在于，步驟2)所述免疫蛋雞的方法包括：每次每只蛋雞免疫0.35～0.6mL的抗生長抑素抗血清與不完全佐劑的混合物；所述免疫的次數為3～4次，每次免疫的間隔為7～10天。

7.根據權利要求4所述方法，其特征在于，步驟3)所述去除雜蛋白的方法包括：對所述分離得到的高免雞蛋的蛋黃進行均質破碎，與10～40倍體積蒸餾水混合后，得卵黃溶液；調節所述卵黃溶液的pH值為5.2～6.0，4～8℃靜置后收集上清。

8.根據權利要求4所述方法，其特征在于，步驟4)所述生長抑素抗獨特型卵黃抗體粗品與酒精的混合方法，包括：將所述生長抑素抗獨特型卵黃抗體粗品與酒精第一混合，將收集得到的第一沉淀用蒸餾水復溶進行第二混合，將收集得到的第二沉淀用蒸餾水復溶進行第三混合；所述第一混合時酒精體積為所述生長抑素抗獨特型卵黃抗體粗品體積的50～60％；所述第二混合時酒精體積為所述第一沉淀復溶后溶液體積的25～30％；所述第三混合時酒精體積為所述第二沉淀復溶后溶液體積的25～30％。

9.利用權利要求4～8所述方法制備得到的生長抑素抗獨特型卵黃抗體。

10.權利要求9所述生長抑素抗獨特型卵黃抗體在促進動物生長中的應用。