[發明專利]利用4-O-去甲基巴爾巴地衣酸合成2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯的方法

有效

• 申請號: 201811286109.0
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN111116370B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 呂雪峰;張偉;黃雪年;李鴻成
• 申請（專利權）人: 中國科學院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號: C07C69/84
• 分類號: C07C69/84;C07C65/05;C07C51/09;C07C67/08;C12P7/40;C12R1/66
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 田鴻儒

本發明提供了一種利用4?O?去甲基巴爾巴地衣酸合成2,4?二羥基?3,6?二甲基苯甲酸甲酯(即合成橡苔)的方法，涉及化學合成技術領域，技術方案為：采用酸水解或堿水解的方法，將4?O?去甲基巴爾巴地衣酸水解為2,4?二羥基?3,6?二甲基苯甲酸；以2,4?二羥基?3,6?二甲基苯甲酸為底物采用甲基化試劑進行甲酯化反應，反應結束后處理即可得到2,4?二羥基?3,6?二甲基苯甲酸甲酯(合成橡苔)。采用新的中間體兩步合成合成橡苔，簡化了合成工藝。

技術領域

本發明涉及化學合成技術領域，具體涉及一種利用4-O-去甲基巴爾巴地衣酸合成2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯(即合成橡苔)的方法。

背景技術

橡苔是一種稀有的地衣資源，一般指生長在橡樹樹干和枝條上的松蘿科扁枝衣屬的櫟扁枝衣，橡苔浸膏和精油被廣泛應用于香水、護膚品、香煙和熏香等日用品，同時，橡苔也作為食品添加劑應用于飲料、烘焙食品、布丁、軟糖等。天然橡苔主要產自于歐洲中南部和北非一代地中海沿岸國家，如法國、意大利等。我國橡苔資源極其稀少，僅在云南開發了橡苔I號和II號，由于地衣原料不同使得香氣有很大的區別，主要作為煙草香精使用。

橡苔浸膏和精油作為一種天然產物制品，其市場和應用存在一些先天不足。首先，天然橡苔資源稀缺，售價高昂。其次，由于原料來源、提取工藝的差異使得橡苔品質不一，而且企業為降低成本會對產品進行調配，使得市場混亂。另外，天然橡苔浸膏和精油是一種混合物，成分復雜，其中部分化合物已被認定為過敏原，歐盟化妝品法規對這些致敏原物質的使用作出了規定和限制。上述不利因素都限制了橡苔的市場應用，因此，鑒定天然橡苔的主要呈香化合物并開發其生產工藝受到了企業和科研人員的關注。研究表明2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯(1CAS:4707-47-5)是橡苔中的主香化合物，因此該化合物被稱為合成橡苔。關于合成橡苔的化學合成路線已經有文獻和專利報道，其中大部分合成路線中都是以不同原料合成關鍵中間體2,5-二甲基間苯二酚(2CAS:488-87-9)和2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸(3CAS:4707-46-4)最后生成2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯，制備過程如圖1所示。但是，在實際生產中，這兩個關鍵中間體的制備工藝復雜，并且收率較低、成本較高，因此采用化學方法生產合成橡苔的方法在實際應用中存在一定的缺陷，限制了合成橡苔市場的發展。

發明內容

為解決上述化學方法生產合成橡苔的方法在實際應用中存在的問題，本發明提供一種產生4-O-去甲基巴爾巴地衣酸(CAS:20372-89-8)的土曲霉菌株、該菌株在發酵生產4-O-去甲基巴爾巴地衣酸中的應用，及利用上述土曲霉菌株發酵生產4-O-去甲基巴爾巴地衣酸進而合成2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯的方法，同時還提供了利用4-O-去甲基巴爾巴地衣酸合成2,4-二羥基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯(即合成橡苔)的方法。

首先，本發明提供一種產生4-O-去甲基巴爾巴地衣酸的土曲霉菌株，所述土曲霉菌株為土曲霉(Aspergillus terreus)MEFC06，已于2018年6月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏中心登記入冊編號為：CGMCC No.15890。

第二，本發明提供上述產生4-O-去甲基巴爾巴地衣酸的土曲霉菌株在發酵生產4-O-去甲基巴爾巴地衣酸中的應用，包括以下步驟：

(1)土曲霉種子液的制備，種子液接種到發酵培養基中發酵培養；

(2)發酵液分離純化得到4-O-去甲基巴爾巴地衣酸。

步驟(1)中所述種子液的制備，具體為：將土曲霉MEFC06接種到PDA平板培養基上，28℃培養2-9天，將平板上的孢子接種到種子培養基中，接種量為10⁶-10⁸個/35mL，28℃、220rpm搖床培養培養1-5天，得到種子液。

步驟(1)中種子液接種到發酵培養基的接種量為按二者體積比3:35。