[發明專利]一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法

在審

• 申請號: 201811286097.1
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN111116706A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;葉賢龍;肖思佳;閆竟宇;郭志謀;張華林
• 申請（專利權）人: 泰州醫藥城國科化物生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/14
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 李開婧

1.一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟如下：

（1）預處理：通過膜分離及低溫高速離心脫脂，用0.5-1M乙酸調pH至4.6-4.8等電點沉淀除去脫脂乳中的酪蛋白，得到澄清的乳清溶液；

（2）將乳清溶液上樣到用電導率為0-10mS/cm的pH4.0-5.0的緩沖液平衡的離子交換色譜柱上，流速為150-500cm/h；上樣完畢用電導率為0-10mS/cm的pH4.0-5.0的緩沖液沖洗色譜柱待280nm吸收值至基線，使用10-90mS/cm的pH4.0-5.0的緩沖液線性梯度洗脫，洗脫體積為10-50倍柱體積，峰收集各餾分，經SDS-PAGE純度檢測合格的餾分合并后濃縮干燥成粉末，即得到精制乳清蛋白。

2.根據權利要求1所述一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟（1）所使用的膜分離系統為0.22-0.65 μm或500-1000kD截留分子量的膜分離膜，過濾完后用純化水進行洗濾，收集截留液及透過液；截留液在2-8℃、8000-10000rpm超速離心后，去除上層脂肪層。

3.根據權利要求1所述一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟（1）所述的膜分離所采用的膜類型可以是中空纖維式、卷式、管式或板框式。

4.根據權利要求1所述一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟（1）所述的膜分離中洗濾次數為3-6次。

5.根據權利要求1所述一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟（2）所用得離子交換色譜技術所用分離材料的基質為瓊脂糖、硅膠或高分子聚合物；粒徑為40-100 μm；配基的結構式可為

、

或

；

上樣體積為柱體積的10-50倍；色譜操作的上樣和洗脫流速可以為150-500 cm/h；色譜純化目標組分的方式為結合模式，使用鹽濃度為0-1M的緩沖液線性梯度洗脫，洗脫洗脫體積為10-50倍柱體積。

6.根據權利要求1所述一種提取母乳中乳清蛋白的純化制備方法，其特征在于，步驟（2）濃縮干燥方式可以為冷凍干燥、真空干燥或噴霧干燥。