[發明專利]一種汞離子的檢測方法

有效

• 申請號: 201811285305.6
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN109444397B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 云雯;楊麗珠;楊哲涵;尤琳烽;劉學成;吳虹
• 申請（專利權）人: 重慶工商大學
• 主分類號: G01N33/52
• 分類號: G01N33/52;G01N21/31
• 代理公司: 南京中律知識產權代理事務所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

1.一種汞離子檢測方法，包括如下步驟：

(1)血紅素-氧化石墨烯復合物的合成，采用現有技術合成H-GNs，上述血紅素-氧化石墨烯復合物簡稱H-GNs；

(2)將核酸分子發卡序列5’-CACCACAAATTCTCTCTrAGGACAAAAAAAGTGGTG-3’加熱到90℃保持5分鐘，然后冷卻2小時至室溫形成核酸分子發卡結構；

(3)DNA酶的形成，在10mM的pH?7.5的Tris-HCl緩沖中將購得的50nM碎片DNA酶序列1和碎片DNA酶序列2與Hg²⁺的待測液和200nM步驟(2)所得核酸分子發卡混合反應，形成DNA酶結構，

上述碎片DNA酶序列1為5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAATTGTGGTTGGTGCGGCACCCATGTGAGAGAA-3’，

上述碎片DNA酶序列2為5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAACTCCTTCCTCTTCGGCACCCATGTGAGAGAA-3’；

(4)核酸分子發卡環的剪切，將步驟(3)所得溶液和10mM?Mg²⁺溶液混合反應15分鐘；

(5)H-GNs催化劑的形成，混合步驟(1)所得H-GNs和步驟(4)所得溶液，用Tris-HCl溶液稀釋，溫育并加入適量NaCl，離心取上清液，該上清液即H-GNs催化劑；

(6)顯色和測定，將步驟(5)所得H-GNs催化劑用于催化含3,3',5,5'-四甲基聯苯胺和H₂O₂的Tris-HCl緩沖溶液的顯色反應，測定其UV-vis吸收光譜，并用標準曲線法計算Hg²⁺濃度，上述3,3',5,5'-四甲基聯苯胺簡稱TMB。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)具體為：將20mL含有10mg氧化石墨烯的水超聲處理1小時，然后，將20mL的0.5mg?mL^-1血紅素溶液與上述氧化石墨烯分散體混合并搖動幾分鐘，然后依次加入200μL氨水溶液和30μL水合肼，在60℃下攪拌3.5小時，離心30分鐘，沉淀用超純水沖洗數次，用超純水稀釋至0.3mg?mL^-1備用。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于步驟(5)所用Tris-HCl溶液pH值為7.5，步驟(6)所用Tris-HCl溶液pH值為5。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于步驟(6)測定的UV-vis吸收光譜是500至800nm范圍內的。