[發(fā)明專(zhuān)利]一種側(cè)流層析試紙及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811269815.4
• 申請(qǐng)日: 2018-10-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109444400B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張素風(fēng);劉麗娜;唐蕊華;李菲;徐峰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/531
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/531;G01N33/543;G01N33/52;G01N33/558
• 代理公司: 西安通大專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

本發(fā)明公開(kāi)了一種側(cè)流層析試紙，包括樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水紙、埋有疏水棉線(xiàn)的紙張和背膠板；樣品墊、結(jié)合墊、埋有疏水棉線(xiàn)的紙張、硝酸纖維素膜和吸水紙按照順序依次兩兩相重疊2mm固定貼在背膠板上將具有一定疏水性質(zhì)的棉線(xiàn)在造紙過(guò)程中埋入紙張，將兩者復(fù)合作為流體通道添加到傳統(tǒng)側(cè)流層析試紙的硝酸纖維素膜前面，改變?cè)嚰垪l結(jié)構(gòu)，減慢目標(biāo)物在硝酸纖維素膜上的流速，延長(zhǎng)目標(biāo)物與探針的反應(yīng)時(shí)間，從而增強(qiáng)檢測(cè)靈敏度。其中所采用的棉線(xiàn)為生活中常見(jiàn)的紡織材料，廉價(jià)易得，采用與紙張類(lèi)似的纖維材料制備而成；且通過(guò)傳統(tǒng)的造紙工藝將棉線(xiàn)和紙復(fù)合，操作簡(jiǎn)單快速，有望實(shí)現(xiàn)批量化生產(chǎn)，用于HIV核酸檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于試紙制備領(lǐng)域，具體涉及一種增強(qiáng)側(cè)流試紙靈敏度的方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著傳染病、食物污染和水污染的發(fā)生率不斷增加，醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全測(cè)試等應(yīng)用顯得越來(lái)越重要，而他們主要是對(duì)體液和其他生物化學(xué)流體中的分析物例如核酸，蛋白質(zhì)，藥物和代謝物等的檢測(cè)。傳統(tǒng)方法是在實(shí)驗(yàn)室中對(duì)樣品進(jìn)行定量分析，但是往往需要大型的，昂貴的分析儀器，而且需要有相應(yīng)專(zhuān)業(yè)技術(shù)的人員操作，同時(shí)對(duì)樣品的需求量也很大，這在基礎(chǔ)設(shè)施不良的發(fā)展中國(guó)家和欠發(fā)達(dá)地區(qū)，或者緊急情況，亦或是家庭健康檢測(cè)是很難實(shí)施。側(cè)流層析試紙作為一種即時(shí)檢測(cè)技術(shù)，已經(jīng)被應(yīng)用于資源受限地區(qū)進(jìn)行疾病診斷，食品安全檢測(cè)和環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域。與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室分析技術(shù)相比，側(cè)流層析試紙具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、便于攜帶等優(yōu)點(diǎn)。目前，這種方法已被用于檢測(cè)病毒、細(xì)菌、細(xì)胞和人血樣中不同核酸和蛋白標(biāo)志物。但是，低靈敏度在一定程度上限制了側(cè)流層析試紙的廣泛應(yīng)用。

目前，已有很多方法用來(lái)增強(qiáng)試紙檢測(cè)靈敏度，例如：基于酶的信號(hào)增強(qiáng)技術(shù)、基于探針的信號(hào)增強(qiáng)技術(shù)和恒溫恒濕技術(shù)等。它們往往需要昂貴的化學(xué)試劑、大型儀器、復(fù)雜的制備過(guò)程或操作步驟。研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)對(duì)樣品進(jìn)行前期預(yù)處理可以增強(qiáng)試紙檢測(cè)靈敏度，如等速電泳技術(shù)分離和紙基濃縮技術(shù)；亦可通過(guò)改變?cè)嚰埳弦后w的流速提升其檢測(cè)靈敏度，如利用石蠟等疏水性物質(zhì)修飾硝酸纖維素膜，制備疏水屏障。上述方法存在制備復(fù)雜，操作繁瑣，成本較高，受環(huán)境影響大且不能批量化生產(chǎn)等缺點(diǎn)，仍然不適用于提高側(cè)流層析試紙的靈敏度，不能廣泛用于資源匱乏地區(qū)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決了現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種側(cè)流層析試紙及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明所述側(cè)流層析試紙，有效減緩目標(biāo)物在硝酸纖維素膜上的流速，增加檢測(cè)目標(biāo)物與硝酸纖維素膜上固定的捕獲探針和對(duì)照探針的反應(yīng)時(shí)間，從而提高檢測(cè)靈敏度，側(cè)流層析試紙制備方法操作簡(jiǎn)單、成本低廉，且有望實(shí)現(xiàn)批量化生產(chǎn)，適用范圍廣。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是，一種側(cè)流層析試紙，包括樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水紙、埋有疏水棉線(xiàn)的紙張和背膠板；樣品墊、結(jié)合墊、埋有疏水棉線(xiàn)的紙張、硝酸纖維素膜和吸水紙按照順序依次兩兩相重疊2mm固定貼在背膠板上。

一種側(cè)流層析試紙的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，取市售棉線(xiàn)，采用十六烷基三甲氧基硅烷溶液對(duì)棉線(xiàn)進(jìn)行預(yù)處理，得到疏水棉線(xiàn)；

步驟2，取針葉木纖維并進(jìn)行疏解，使纖維均勻分散，形成紙漿懸浮液，將步驟1處理過(guò)的棉線(xiàn)放置于紙張成型網(wǎng)上，向紙張成形器中加入所述紙漿懸浮液，脫水形成濕紙頁(yè)，再將濕紙頁(yè)干燥得到埋有疏水棉線(xiàn)的紙張。

步驟3，取樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水紙、步驟2所制備的埋有疏水棉線(xiàn)的紙張和背膠板，將樣品墊、結(jié)合墊、埋有疏水棉線(xiàn)的紙張、硝酸纖維素膜和吸水紙按照順序依次兩兩相重疊貼在背膠板上，即得到側(cè)流層析試紙。

步驟中，在濃度為0.01wt％～0.25wt％的十六烷基三甲氧基硅烷溶液中將棉線(xiàn)浸泡20min～30min，清洗干凈后烘干。

步驟1中所用的十六烷基三甲氧基硅烷溶液用乙醇稀釋?zhuān)⒓尤氪呋瘎┮宜帷?/p>

乙醇和乙酸的體積比為9:1。