[發明專利]一種烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法

有效

• 申請號: 201811267977.4
• 申請日: 2018-10-29
• 公開（公告）號: CN109076961B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 侯金艷;吳麗芳;陳雪
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙) 34124
• 代理人: 丁瑞瑞

1.一種烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取野外烏桕當年生幼嫩葉片為外植體，經表面消毒后，切塊；

2)將步驟1)獲得的葉片切塊接種于誘導培養基中進行不定芽的誘導培養，產生不定芽；

3)將步驟2)產生的不定芽轉接于新鮮的誘導培養基中進行不定芽的繼代伸長培養；

4)待步驟3)中繼代伸長培養后的不定芽長至2-4cm，并伴有2-6片葉子時，切下不定芽，清洗后進行瓶外不定根誘導預處理；

5)將步驟4)中經不定根誘導預處理后的不定芽定植于營養基質中，進行不定根的誘導和成苗培養，獲得烏桕再生植株；

在步驟2)和3)中，所述誘導培養基為添加10-50mg/L VC、0.2-2.0mg/L 2-ip、0.1-1.0mg/L ZT、0.02-0.5mg/L NAA、20-30g/L蔗糖和6.5-8.0g/L瓊脂的WPM培養基；

在步驟4)中，所述不定根誘導預處理的過程為將清洗后的不定芽基部浸入500-1000mg/L K-IBA溶液中處理5-20s。

2.根據權利要求1所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，在步驟1)中，所述表面消毒的過程為將葉片剪去葉柄，于流水下沖洗20-30min，70％酒精擦拭后，置于無菌環境中，用無菌水沖洗2-3遍，70％酒精消毒20-30s，10％-20％過氧化氫溶液消毒2-4min，無菌水沖洗4-6遍。

3.根據權利要求1所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，在步驟1)中，所述切塊為切成(0.3-1.0)×(0.5-1.0)cm²大小的葉片切塊。

4.根據權利要求1所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，在步驟5)中，所述不定芽定植的過程為將經不定根誘導預處理后的不定芽的形態學下端定植于營養基質中。

5.根據權利要求4所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，所述營養基質在使用前一天澆透水并噴施0.2-0.5％多菌靈溶液和1/4倍WPM大量元素。

6.根據權利要求1所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，在步驟5)中，所述不定根誘導和成苗培養的條件為：溫度22-28℃，濕度70-85％，光照強度1500-2200lx，每隔3-5d澆一次水，定植的前三周每隔一周噴施一次0.2-0.5％多菌靈溶液。

7.根據權利要求1所述的烏桕組培不定芽瓶外生根育苗的方法，其特征在于，所述不定芽的誘導培養為光照培養3-4周，所述不定芽的繼代伸長培養為光照培養3周。