[發明專利]有核紅細胞模擬粒子及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201811264421.X
• 申請日: 2018-10-29
• 公開（公告）號: CN109459372B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 劉旭;蔡清華;王丹鳳;林月;朱子是;魏學芹
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N15/10
• 分類號: G01N15/10
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 王瑩

有核紅細胞模擬粒子及其制備方法與應用，屬于醫學檢測技術領域。解決了如何提供一種工藝簡單、產率高、產物穩定性好的有核紅細胞模擬粒子的制備方法的問題。本發明的制備方法：先分離并洗滌紅細胞，得到純化紅細胞；然后用稀釋液稀釋純化紅細胞，加入加載劑，在脈沖電磁場的作用下將加載劑引入到純化紅細胞內；再向引入加載劑后的細胞中加入細胞固定液，18?28℃固定，洗滌細胞，用細胞保存液保存，得到有核紅細胞模擬粒子。該制備步驟簡單，所用試劑成分較單一，制得的產物產率較高，適合大量的生產。

技術領域

本發明屬于醫學檢測技術領域，具體涉及一種有核紅細胞模擬粒子及其制備方法與應用。

背景技術

正常的人的成熟紅細胞不含有細胞核，主要成分是蛋白質和鐵，具備運輸氧的能力，有核紅細胞屬于紅細胞發育過程中的初始幼稚狀態，一般存在于骨髓中，但一些病理情況下，外周血內也會出現有核紅細胞(NRBC)，對人體血液中有核紅細胞的檢測，可以為一些疾病的診斷提供依據。

其臨床意義如下：

1、增生性貧血：最常見于各種貧血，急性失血性貧血、巨幼紅細胞性貧血、嚴重的低色素性貧血；以出現晚幼紅細胞或中幼紅細胞為多見；外周血中出現有核紅細胞表示骨髓中紅細胞系增生明顯活躍；

2、紅血病、紅白血病：骨髓中幼稚紅細胞異常增生并釋放入血，以原紅細胞、早幼紅細胞為多見；

3、髓外造血：骨髓纖維化時，脾、肝、淋巴結等組織恢復胚胎時期的造血功能，這些組織因缺乏對血細胞釋放的調控能力，幼稚血細胞大量進入外周血；各發育階段的幼紅細胞都可見到，并可見到幼稚粒細胞及巨核細胞；

4、其他：如骨髓轉移癌、嚴重缺氧等。

目前，越來越多的血細胞分析儀具有檢測有核紅細胞的功能，為了保證測值的準確性，需對其進行質量控制，即使用含有有核紅細胞模擬粒子的質控品進行檢測。

美國專利US5559037(Kim等人)公開了一種用于有核紅細胞和白細胞的流式細胞計數分析的方法。該方法使用了熒光、低角度光散射和軸光損失測量法，以便從白色血樣中分辨出NRBC。美國專利US5879900(Kim等人)進一步地公開了一種辨別NRBC、白細胞和受損白細胞的方法，以及通過流式細胞儀提供血液樣品中的白細胞差別的方法，這種方法的缺點是準確性不高。

美國專利US7176031和US6962817公開了使用人工合成粒子模擬人有核紅細胞的方法。這種方法的缺陷在于合成粒子的生產工藝復雜，成本較高。美國專利US7354767公開了使用普通哺乳動物紅細胞(不含細胞核)制備有核紅細胞模擬粒子的方法。這種方法制備的模擬粒子與人有核紅細胞的細胞核大小接近，適用于采用阻抗法檢測有核紅細胞的血液細胞分析儀。但這種模擬粒子不含細胞核，不適于模擬人有核紅細胞被特定熒光染料染色后的熒光特性。美國專利US7195919公開的技術方案通過在紅細胞表面連接生物大分子(如：核酸、膚鏈等)，使其能夠模擬人有核紅細胞的熒光特性。這種方法的不足之處在于工藝復雜，且作為原料的生物大分子成本較高。