[發明專利]水貂激活素B蛋白及其制備與應用

有效

• 申請號: 201811258408.3
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN109293763B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 張宇飛;王麗英;許保增;王士勇;孟慶江;朱海瑛;曹新燕;常彤
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C12N15/16;C12N15/85;C12N5/10;A61K38/22;A61P43/00;A61P37/02;A61P25/00;A61P19/08;A61P5/28;A61P5/30;A61P15/08
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

本發明涉及分子生物學領域，具體而言，涉及一種水貂激活素B蛋白及其制備與應用。所述的激活素B蛋白由兩個水貂激活素βB亞基組成，從水貂動物中通過分子生物學技術得到其基因序列，然后在體外表達并純化的具有生物活性的激活素B蛋白。激活素B蛋白在水貂動物中的研究還比較少，本發明分離得到了其基因序列，并提高了其高純度蛋白的表達方法，可為相關研究提供研究基礎和新的思路，大大增加了激活素B蛋白的研究與應用前景。

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，具體而言，涉及一種水貂激活素B蛋白及其制備與應用。

背景技術

激活素(Actvin,ACT)，又名活化素，是Vale等和Ling等首先從豬卵泡液中分離純化出來的一種糖蛋白激素，因能與抑制素(Inhibin,INH)分別特異性促進和抑制垂體細胞分泌卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormone，FSH)而得名，屬于轉化生長因子β超家族成員。激活素主要是由卵巢顆粒細胞和胎盤合成分泌，由于其具有特異性地促進垂體細胞分泌及合成卵泡刺激素的生物學活性，因而被命名為激活素。

ACT同INH均為兩個亞基構成的二聚體。ACT由β亞單位構成，包括同源二聚體ACTA(βA-βA)和ACTB(βB-βB)或異源二聚體ACTAB(βA-βB)。三種分子結構的激活素具有類似的生物學活性，其作用的特異性與其受體后信號傳導的組織差異有關。其中βB亞基在雄性水貂的睪丸中表達量非常高，說明其在精子發生過程中發揮了重要功能。

水貂(Mustula Vison)是我國珍貴的毛皮動物，水貂皮是世界上“三大裘皮”之一，在國際毛皮市場上享有盛譽。水貂在動物分類學屬于哺乳綱，食肉目，鼬科，鼬屬，是一種小型的、經濟價值非常高的毛皮動物。水貂是起源北美的，由于其帶來可觀的經濟效益，歐洲曾經保持每年增加2500萬只的飼養量。目前國內水貂的養殖量大但養殖水平低下，尤其是水貂的繁殖性能，不但產仔數少而且生活率還低。

然而，目前國內對水貂ACTB的研究還較少，尚無水貂ACTB蛋白質與cDNA序列的報道，這為進一步探討研究水貂ACTB的功能、其表達的時空特異性、相關信號通路及對水貂繁殖力等的研究都將造成了障礙。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新穎的激活素B蛋白，并對其制備方法與功能進行了研究。

所述的激活素B蛋白由兩個水貂激活素βB亞基(氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示)組成，從水貂動物中分離得到。

激活素B蛋白在水貂動物中的研究還比較少，本發明分離得到了其基因序列，并提高了其高純度蛋白的表達方法，可為相關研究提供研究基礎和新的思路，大大增加了激活素B蛋白的研究與應用前景。

ACTB可以降低LH誘導雄激素的生產，增強垂體分泌FSH的能力，在雌性動物中促進卵泡發育以及卵母細胞成熟，在雄性動物中可以提高精子活力，精子數量，提高配種能力。因此ACTB在提高水貂繁殖性能中具有廣闊的應用價值。本發明還發現βB亞基在雄性水貂的睪丸中表達量非常高，說明其在精子發生過程中發揮了重要功能。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發明的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發明一個實施例中水貂INHBB基因擴增結果；M.DNA相對分子質量標準(DL2000)；1.INHBB基因擴增產物；