[發(fā)明專利]一種定量測定貓血清淀粉樣蛋白A的化學發(fā)光免疫分析試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811254365.1
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN109444420A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設計）人: 曾妮;冉鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 成都普利泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 成都嘉企源知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51246
• 代理人: 胡林

本發(fā)明公開了一種定量測定貓血清淀粉樣蛋白A的化學發(fā)光免疫分析試劑盒，該試劑盒包括了已包被的貓血清淀粉樣蛋白A單克隆抗體的毛細管、堿性磷酸酶標記的貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體、貓血清淀粉樣蛋白A校準品和作用于堿性磷酸酶的化學發(fā)光底物。本發(fā)明能夠定量測定貓血清淀粉樣蛋白A，且加樣量少，成本低，具有高靈敏度、高特異性、高準確度、高精密度、操作方法簡單和檢查效率高的優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明屬于免疫分析技術領域，尤其涉及一種定量測定貓血清淀粉樣蛋白A的化學發(fā)光免疫分析試劑盒。

背景技術

貓血清淀粉樣蛋白A（SAA）是淀粉樣沉積的前體物質(zhì)，是在研究淀粉樣變性的過程中發(fā)現(xiàn)的，其后作為一種急性時相反應蛋白，屬于載脂蛋白家族中的異質(zhì)類蛋白質(zhì)。在急性時相反應中，經(jīng)白細胞介素-1、白細胞介素-6和腫瘤壞死因子刺激，貓血清淀粉樣蛋白A在肝臟中由被激活的巨噬細胞和纖維母細胞合成，可升高到最初濃度的100 -1000倍。在炎癥期間，貓血清淀粉樣蛋白A能與血漿高密度脂蛋白（HDL）結(jié)合，調(diào)節(jié)高密度脂蛋白的代謝。此外，貓血清淀粉樣蛋白A的降解產(chǎn)物能以淀粉樣蛋白A(AA)原纖維的方式沉積在不同的器官中，在慢性炎癥疾病中這是一種嚴重的并發(fā)癥。貓血清淀粉樣蛋白A升高可發(fā)生在動脈粥樣硬化、糖尿病腎病、急性心肌梗死、冠心病、慢性腎臟疾病等炎癥性疾病中。

在獸醫(yī)學中，貓血清淀粉樣蛋白A是一種靈敏的炎癥和組織損傷標志物，測定血液中的貓血清淀粉樣蛋白A可以用于診斷亞臨床炎癥、監(jiān)控動物炎癥和感染的治療效果以及監(jiān)控病患外科手術。貓血清淀粉樣蛋白A是一種主要的貓急相蛋白。當貓患有系統(tǒng)性炎癥時，貓血清淀粉樣蛋白A濃度水平會出現(xiàn)升高。目前，貓血清淀粉樣蛋白A已經(jīng)被建議作為一種合適的標志物用以診斷貓炎癥反應。此外，還有報道顯示貓貓血清淀粉樣蛋白A可以作為一種患病個體的預后標志物。

目前關于貓貓血清淀粉樣蛋白A的檢測方法有乳膠凝集免疫檢測法，免疫層析分析法、酶聯(lián)免疫吸附方法。

上述所說方法無法實現(xiàn)精確定量。且靈敏度不夠高，檢測范圍窄，影響因素較多，易造成假陰性和假陽性。化學發(fā)光免疫檢測(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，是將具有高靈敏度的化學發(fā)光測定技術與高特異性的免疫反應相結(jié)合，用于各種抗原、抗體、激素、酶、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項免疫測定技術。化學發(fā)光法具有靈敏度高，特異性強，準確度高，檢測范圍寬等優(yōu)點。相對于酶聯(lián)免疫檢測法的半定量，化學發(fā)光是真正的定量，且檢測速度較快，更為方便。同時，化學發(fā)光標記物穩(wěn)定，試劑有效期長，大大方便了臨床應用的需要。

申請公布號為CN108169219A，申請公布日為2018年6月15日的中國發(fā)明專利申請公布了一種定量檢測貓血清淀粉樣蛋白A的試劑盒，試劑盒包括：辣根過氧化物酶標記的貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體；包被有貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體的載體；貓血清淀粉樣蛋白A校準品；化學發(fā)光底物。同時，試劑盒的制備方法包括：用辣根過氧化物酶標記貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體；以貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體包被載體；以貓血清淀粉樣蛋白A純品配制貓血清淀粉樣蛋白A校準品；分裝上述貓血清淀粉樣蛋白A校準品、辣根過氧化物酶標記的貓血清淀粉樣蛋白A的單克隆抗體和該HRP所作用的化學發(fā)光底物；組裝為成品。本發(fā)明的試劑盒靈敏度高，特異性好，定量檢測結(jié)果準確度高，使用成本低，更易推廣應用。

1、該專利用到的載體是磁性微粒、微孔板、塑料管或塑料珠，采用這樣的載體存在上樣量較大，使用的血清樣本量較大的缺陷，檢測效率較低；

2、該專利提供的試劑盒并不能用于定量檢測貓血清淀粉樣蛋白A。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于現(xiàn)有技術測定貓血清淀粉樣蛋白A存在的上述缺陷，本發(fā)明提出了定量測定貓血清淀粉樣蛋白A的化學發(fā)光免疫分析試劑盒，通過該試劑盒能夠定量測定貓血清淀粉樣蛋白A，且加樣量少，成本低，具有高靈敏度、高特異性、高準確度、高精密度、操作方法簡單和檢查效率高的優(yōu)點。