[發明專利]一種獸用狂犬病毒中和抗體化學發光檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201811254348.8
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN109444410A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 肖紅;冉鵬
• 申請（專利權）人: 成都普利泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/552
• 分類號: G01N33/552;G01N33/569
• 代理公司: 成都嘉企源知識產權代理有限公司 51246
• 代理人: 胡林

本發明公開了一種獸用狂犬病毒中和抗體化學發光檢測試劑盒，該試劑盒包括包被了狂犬病毒抗原的毛細管、酶結合物、發光底物和清洗液。本發明檢測方法效率高、靈敏性高、特異性強、自動化程度高，操作簡單快速且檢測范圍廣、無污染、保存時間長，能有效改善目前市面上產品的不足。

技術領域

本發明屬于免疫分析技術領域，尤其涉及一種獸用狂犬病毒中和抗體化學發光檢測試劑盒。

背景技術

狂犬病是由狂犬病毒引起的一種傳染性強、危害性大、病死率高的人畜共患病，目前尚無可以治愈狂犬病的藥物。我國是狂犬病的高發國家，針對狂犬病的措施以預防為主。犬、貓等動物是狂犬病毒的主要儲存宿主和傳播宿主，因此，對狂犬病流行地區的犬、貓等動物實行強制免疫接種與免疫后抗體效價監測相結合，是防控措施的重要環節。動物體內狂犬病毒中和抗體的高低是衡量疫苗免疫效果的重要指標。

目前，WHO和OIE推薦的用于狂犬病毒抗體檢測的方法有快速熒光灶抑制試驗（Rapid fluorescent focus inhibition test，RFFIT）、熒光抗體病毒中和試驗（Fluorescence antibody virus neutralization test，FAVNT）。近年來，國內外先后報道了多種狂犬病毒抗體檢測技術，如流式細胞計數法、間接ELISA技術、競爭ELISA技術、夾心ELISA技術、膠體金層析診斷試紙條技術等。

中國專利公開號為CN101936998B的專利申請公開了一種犬用抗狂犬病毒IgG抗體ELISA檢測試劑盒，中國專利公開號為CN1547027A的專利公開了一種用間接酶免疫吸附試驗檢測犬狂犬病毒IgG試劑盒及制備方法。以上專利均為ELISA檢測方法，用時長，操作自動化程度低。

中國專利公開號為CN1326101A的專利申請公開了一種膠體金免疫層析狂犬病病毒抗體檢測試劑條及制備方法，中國專利公開號為CN104360061A的專利申請公開了一種狂犬病病毒IgG抗體免疫金標檢測試紙及制備方法。以上專利均為膠體金檢測方法，均為定性檢測，靈敏度和特異性較低。

RFFIT和FAVNT兩種方法雖能準確測定狂犬病毒中和抗體水平，但均需采用活細胞和活病毒進行測定，均需昂貴的實驗器材，且檢測時間長，因此不適用于大規模的血清檢測。ELISA技術、膠體金等方法不能兼顧效率高、靈敏性高、特異性強和自動化程度高等優點，且上樣量較大，需要血清樣本量大。

發明內容

為解決上述現有技術的不足，提供一種獸用狂犬病毒中和抗體化學發光檢測方法。此檢測方法效率高、靈敏性高、特異性強、自動化程度高，操作簡單快速且檢測范圍廣、無污染、保存時間長，能有效改善目前市面上產品的不足。本發明應用于檢測動物血清或血漿中狂犬病毒中和抗體的濃度。

為了達到上述技術目的，本發明所采用的技術方案是：

一種獸用狂犬病毒中和抗體化學發光檢測試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括包被了狂犬病毒抗原的毛細管、酶結合物、發光底物和清洗液。

所述狂犬病毒抗原為自身帶有活性基團或經過修飾獲得活性基團的狂犬病毒G蛋白重組抗原、滅活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒樣顆粒。

所述活性基團為氨基、羧基、巰基或羥基。

所述毛細管為高精度毛細管，其外徑為1.18±0.02mm，內徑為0.7±0.005m、長度為30±1mm；材質為高硼硅3.3玻璃。

所述毛細管上帶有氨基、羧基、羥基、巰基、醛基、環氧基、氰酸酯基、異氰酸酯基、氰基、異氰基、馬來酰胺氨基、N-羥基琥珀酰亞胺酯基、酚羥基或者酚羥基衍生基團中的一種。

所述包被了狂犬病毒抗原的毛細管通過如下方法制成：該方法包括修飾毛細管步驟，修飾狂犬病毒G蛋白重組抗原、滅活狂犬病全病毒或狂犬病毒病毒樣顆粒步驟，包被步驟和封閉步驟；