[發明專利]一種PDMS微控板處理方法及其應用在審
| 申請號： | 201811248856.5 | 申請日： | 2018-10-24 |
| 公開（公告）號： | CN109576263A | 公開（公告）日： | 2019-04-05 |
| 發明（設計）人： | 吳雙;方南;周璟 | 申請（專利權）人： | 新格元（南京）生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人： | 劉豐 |
| 地址： | 210043 江蘇省南京市江北新*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 反轉錄 控板 捕獲 細胞 細胞裂解液 表面吸附 生物實驗 細胞裂解 細胞懸液 相容性 應用 測試 | ||
1.一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，包括如下步驟：
S1:PDMS表面處理：吸取PBST溶液，加于PDMS表面，處理時間為10-15min；
S2:加入細胞：加入細胞懸液，靜置處理后用PBS洗滌將多余留在表面的細胞沖走；
S3:捕獲mRNA：加入細胞裂解液，使細胞裂解，獲得mRNA；
S4:反轉錄及PCR擴增；將捕獲到的mRNA進行反轉錄，獲得cDNA；并將cDNA進行PCR擴增，得到PCR產物；
S5:純化DNA。
2.根據權利要求1所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，所述的S1步驟中PBST溶液為：PBST溶液為PBS緩沖液與吐溫混合液，所述的吐溫濃度為0.01％-0.1％。
3.根據權利要求1所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，所述的S1步驟中PBST溶液為：PBST溶液為PBS緩沖液與吐溫20混合液，所述的吐溫20濃度為0.02％-0.1％。
4.根據權利要求3所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，所述的S1步驟中PBST溶液為：PBST溶液的中吐溫-20濃度為0.02％，所述的處理時間為15min。
5.根據權利要求4所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，所述S1步驟中的0.02％PBST溶液制備方法為：用無核酸酶水配制20％Tween-20母液，然后按照PBS：Tween-20母液＝1000:1的比例配制0.02％PBST，充分渦旋混勻。
6.根據權利要求4所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，所述S1步驟中的0.02％PBST溶液制備方法為：按照PBS：Tween-20＝99.98:0.02的比例配制0.02％PBST，充分渦旋混勻。
7.根據權利要求1所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，還包括DNA質檢。
8.根據權利要求2所述的一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，包括S5步驟中DNA純化方法為磁選純化。
9.根據權利要求1-8所述的任一種PDMS微控板處理方法，其特征在于，用于哺乳動物細胞DNA提取。
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