[發明專利]糖苷水解酶家族7蛋白基因及其編碼的蛋白和應用有效
| 申請號： | 201811240724.8 | 申請日： | 2018-10-23 |
| 公開（公告）號： | CN109280673B | 公開（公告）日： | 2021-02-09 |
| 發明（設計）人： | 胡興;李洪波;王曉紅 | 申請（專利權）人： | 懷化學院 |
| 主分類號： | C12N15/56 | 分類號： | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02 |
| 代理公司： | 北京中政聯科專利代理事務所(普通合伙) 11489 | 代理人： | 秦佩 |
| 地址： | 418000 湖*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 糖苷 水解 家族 蛋白 基因 及其 編碼 應用 | ||
1.糖苷水解酶家族7蛋白基因，其特征在于：所述糖苷水解酶家族7蛋白基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一種如權利要求1所述的糖苷水解酶家族7蛋白基因編碼的蛋白質，其特征在于：所述蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一種重組載體，由空載體和插入該空載體的目的基因組成，其特征在于，所述目的基因為權利要求1所述的糖苷水解酶家族7蛋白基因。
4.根據權利要求3所述的重組載體，其特征在于，所述空載體為pET 28載體。
5.一種重組菌，其特征在于：所述重組菌為權利要求3所述的重組載體轉化的重組菌。
6.根據權利要求2所述蛋白質的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
1)將權利要求1所述的基因重組構建到載體中；再轉化到大腸桿菌菌株中，得到表達株；
2)將步驟1)表達株在LB液體培養基中培養，并加入0.1～0.5mM的IPTG誘導，發酵完畢，超聲破碎，離心取上清，得可溶性重組的糖苷水解酶家族7蛋白。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，還包括蛋白純化步驟：用鎳親合層析柱對步驟2)得到的上清液進行純化，先用平衡緩沖液平衡層析柱，再將上清液過柱，用含10-50mM咪唑的pH 8.0緩沖液預洗柱子，然后用含100mM～200mM咪唑的pH 8.0緩沖液溶液將融合蛋白洗脫下來即可。
8.根據權利要求2所述的蛋白質在制備葡萄糖中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述蛋白質將纖維素分解為葡萄糖的應用。
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