[發(fā)明專利]一種生物源二肽基肽酶-IV抑制劑的制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811237254.X | 申請日： | 2018-10-23 |
| 公開（公告）號： | CN109182435B | 公開（公告）日： | 2021-12-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 唐云平;江曉霞;丁國芳;余方苗;楊最素;黃芳芳;陳艷 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江海洋大學(xué) |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K14/78;A61P3/10 |
| 代理公司： | 杭州杭誠專利事務(wù)所有限公司 33109 | 代理人： | 尉偉敏 |
| 地址： | 316100 浙江省舟山市普陀區(qū)普*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 二肽 肽酶 iv 抑制劑 制備 方法 | ||
本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域，為解決日本黃姑魚加工過程中產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，資源利用率低的問題，提供一種生物源二肽基肽酶?IV抑制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)將日本黃姑魚魚皮預(yù)處理得魚皮粉，然后將魚皮粉提取膠原蛋白，離心干燥，得日本黃姑魚魚皮膠原蛋白；(2)利用復(fù)合酶對步驟(1)得到的日本黃姑魚魚皮膠原蛋白進(jìn)行酶解，得日本黃姑魚魚皮膠原肽；(3)將日本黃姑魚魚皮膠原肽通過二肽基肽酶篩選試劑盒篩選，即得生物源二肽基肽酶?IV抑制劑。本發(fā)明以日本黃姑魚魚皮為主要原料，通過較為高效的工藝制得二肽基肽酶?IV抑制肽，該抑制肽具有很好的抑制二肽基肽酶?4的作用，具有很好的抗高血糖的功效。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種生物源二肽基肽酶-IV抑制劑的制備方法。
背景技術(shù)
糖尿病已成為繼惡性腫瘤、心血管之后，第三大嚴(yán)重威脅人類健康和生命的代謝性疾病，它能引發(fā)腦血管疾病、冠心病、視網(wǎng)膜病變等多種并發(fā)癥，甚至死亡。目前，糖尿病的控制與治療主要是依靠食物控制和藥物。治療糖尿病的藥物主要是人工合成的藥物，它們都有一定的毒副作用。
腸促胰島素藥物中的二肽基肽酶-4(Dipeptidylpeptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)是一種絲氨酸蛋白酶，能迅速裂解和失活腸促胰島素、神經(jīng)肽和細(xì)胞因子。DPP-4可特異性切斷GLP-1(胰高血糖素樣肽-1)肽鏈N端2位上的丙氨酸或脯氨酸殘基，從而使GLP-1失活。GLP-1作為一種重要的腸促胰島素，除能促進(jìn)胰島素分泌及抑制胰高血糖素分泌外，還具有增加飽膩感、減緩胃排空時(shí)間、抑制胰島β細(xì)胞凋亡和促進(jìn)β細(xì)胞增殖等作用。由于可被DPP-4迅速降解，GLP-1的體內(nèi)半衰期極短，若能抑制DPP-4活性則可有效延長GLP-1的作用時(shí)間，從而有利于降低血糖水平，具有治療糖尿病的作用。
DPP-IV抑制肽無論是從有效性還是安全性，對糖尿病都具有較好的療效。來源于食品蛋白DPP-IV抑制肽具有來源廣泛、安全性高、降血糖效果好等優(yōu)點(diǎn)，已成為關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。
日本黃姑魚是我國重要的新養(yǎng)殖品種之一，在加工過程中產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，資源利用率低。中國專利文獻(xiàn)上公開了“一種日本黃姑魚魚皮明膠的制備方法”，其公告號為CN10841037A，該發(fā)明提供了一種工藝簡單，能夠充分利用日本黃姑魚的下腳料的方法，但是該發(fā)明工藝復(fù)雜，不利于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了克服日本黃姑魚加工過程中產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，資源利用率低的問題，提供了一種生物源二肽基肽酶-IV抑制劑的制備方法，通過本發(fā)明制備的活性肽生理活性顯著，可用于藥品、功能食品、食品等領(lǐng)域，因此具有良好的應(yīng)用前景。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種生物源二肽基肽酶-IV抑制劑的制備方法，包括以下步驟：
(1)將日本黃姑魚魚皮預(yù)處理得魚皮粉，然后將魚皮粉置入2～5wt％的乙酸溶液中，按照每g魚皮粉中加入0.01～0.03mg胃蛋白酶的添加量加入胃蛋白酶，于溫度3～5℃條件下提取膠原蛋白，離心干燥，得日本黃姑魚魚皮膠原蛋白；
(2)利用復(fù)合酶對步驟(1)得到的日本黃姑魚魚皮膠原蛋白進(jìn)行酶解，得日本黃姑魚魚皮膠原肽；
(3)將日本黃姑魚魚皮膠原肽通過二肽基肽酶篩選試劑盒篩選，即得生物源二肽基肽酶-IV抑制劑。
步驟(3)中所述通過二肽基肽酶篩選試劑盒篩選的步驟按照二肽基肽酶ⅣELISA試劑盒(供應(yīng)商為上海江萊生物科技有限公司)的說明書進(jìn)行。
作為優(yōu)選，步驟(1)中，所述預(yù)處理工藝為：
(a)將魚皮清洗后，冷凍干燥，粉碎至粒徑為25～50μm，得魚皮冷凍粉；
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于浙江海洋大學(xué)，未經(jīng)浙江海洋大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201811237254.X/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
