[發(fā)明專利]一種以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型及其方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811234898.3
• 申請日: 2018-10-23
• 公開（公告）號: CN109371102B
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發(fā)明（設計）人: 宋偉;趙宏;王曉娟;阿曼尼薩·圖爾蓀托合提;杜伯雨;繆時英;王琳芳
• 申請（專利權）人: 中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所
• 主分類號: C12Q1/37
• 分類號: C12Q1/37;C12N9/64;C12N15/57
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 李紅偉;孟祥斌

1.一種以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型，其包括RHBDD1蛋白或其截短體蛋白、熒光標記的底物短肽、脂質體轉染試劑以及模型緩沖液，所述的RHBDD1蛋白的截短體蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3所示，所述的熒光標記的底物短肽為熒光標記的KEREN短肽。

2.根據(jù)權利要求1所述的以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型，其中，所述KEREN短肽的序列如SEQ ID NO: 4所示。

3.根據(jù)權利要求1所述的以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型，其中，脂質體轉染試劑為Invitrogen? Lipofectamine? 3000。

4.根據(jù)權利要求1所述的以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型，其中，模型緩沖液為含有20mM的Hepes和150mM的NaCl的水溶液。

5.一種建立以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物篩選模型的方法，其包括：

a）加入RHBDD1蛋白或其截短體蛋白、熒光標記的底物短肽、脂質體轉染試劑以及模型緩沖液，并混勻；

b）加入待測藥物；

c）避光反應2~4小時；

d）測量熒光值變化；

所述的RHBDD1蛋白的截短體蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQID NO: 3所示，所述的熒光標記的底物短肽為熒光標記的KEREN短肽。

6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其中，

在步驟a）中，加入0.4-1.2μg的RHBDD1蛋白或其截短體蛋白、0.5-3.5μM的熒光標記的底物短肽以及1-3μl的脂質體轉染試劑，補充模型緩沖液至20-80μl，并混勻；

在步驟b）中，每20-80μl的篩選模型中，加入2~300μM待測藥物。

7.RHBDD1截短體蛋白在制備用于篩選以RHBDD1為靶點的抗腫瘤藥物的模型中的用途，所述的RHBDD1截短體蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3所示，所述的模型還包括熒光標記的底物短肽、脂質體轉染試劑，所述的熒光標記的底物短肽為熒光標記的KEREN短肽。