[發(fā)明專利]基于氧化鋅納米線的微囊藻毒素傳感器及制備方法、應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811233842.6
• 申請日: 2018-10-23
• 公開（公告）號: CN109490262B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁麗媛;王德強(qiáng);唐婧;王森;蔣海濤;陸文強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院重慶綠色智能技術(shù)研究院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京元本知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

1.一種基于氧化鋅納米線的微囊藻毒素傳感器的制備方法，其特征在于，包括步驟：將帶末端氨基和熒光雙官能團(tuán)的微囊藻毒素適配體DNA對氧化鋅納米線進(jìn)行表面化學(xué)反應(yīng)修飾，使得微囊藻毒素適配體DNA通過化學(xué)共價的方式固定在氧化鋅納米線表面；

其中，所述氧化鋅納米線是采用無催化劑化學(xué)氣相沉積法制備得到的，其步驟為：

以質(zhì)量比為3：1稱取氧化鋅和金剛石粉末均勻平鋪于石英舟槽內(nèi)，得到混合粉體；

將混合粉體和經(jīng)過刻蝕處理的硅/二氧化硅基底置于管式爐內(nèi)加熱升溫至450度，并停留3-5分鐘，然后再次升溫至960度，恒溫3-6分鐘，且當(dāng)升溫至600度時，通入氧氣；

其中，加熱過程中，當(dāng)溫度為450度以下時，保持管式爐內(nèi)氣壓在10千帕以下；當(dāng)溫度從450度升溫至960過程中，氣壓逐漸升至11KPa-30KPa，并保持恒壓直至氧化鋅納米線生長完成；

所述氧化鋅納米線的直徑為100-200nm，長度為50-100um。

2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，采用偶聯(lián)劑法對氧化鋅納米線經(jīng)表面化學(xué)反應(yīng)修飾，以硅烷試劑或磷酸脂作為偶聯(lián)劑。

3.如權(quán)利要求2中所述的制備方法，其特征在于，以硅烷試劑作為偶聯(lián)劑，采用微囊藻毒素適應(yīng)體DNA對氧化鋅納米線進(jìn)行表面化學(xué)反應(yīng)共價修飾的步驟，具體包括步驟：

將生長在硅/二氧化硅基底上的氧化鋅納米線進(jìn)行空氣等離子體處理，使用功率10w的等離子體清洗機(jī)處理30分鐘；

將清洗后的氧化鋅納米線與帶末端環(huán)氧乙烷的硅烷試劑在無水甲苯中反應(yīng)3小時，反應(yīng)溫度為60度；

采用無水甲苯以及丙酮清洗除去多余的反應(yīng)物，得到帶環(huán)氧乙基的氧化鋅納米線；

將帶環(huán)氧乙基的氧化鋅納米線與帶末端氨基和熒光分子的微囊藻毒素適配體DNA以1：10的摩爾濃度比在磷酸緩沖體系中作用5小時，從而通過氨基與環(huán)氧乙基的親核作用將微囊藻毒素適配體DNA鍵接到氧化鋅納米線表面。

4.一種基于氧化鋅納米線的微囊藻毒素傳感器，其特征在于，所述微囊藻毒素傳感器是采用如權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的制備方法制備得到。

5.一種基于氧化鋅納米線的微囊藻毒素傳感器在微囊藻毒素檢測中的應(yīng)用，其特征在于，包括步驟：將如權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的制備方法預(yù)先制備得到的帶熒光基團(tuán)的氧化鋅納米線與含有MC-LR的水體作用，其作用條件為：

與含有5mM MgCl2的50mM Tris-buffer溶液在震蕩下作用1小時，使得氧化鋅納米線表面的微囊藻毒素適配體DNA末端的熒光基團(tuán)被包埋。