[發(fā)明專利]miR-2682-5p作為腎纖維化標(biāo)志物的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811231315.1
• 申請(qǐng)日: 2018-10-22
• 公開（公告）號(hào): CN109234381B
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱蕓;滕兆偉;李桂萍;孫陽;楊芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省玉溪市人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12N15/11;A61K31/7105;A61K48/00;A61P13/12
• 代理公司: 北京慧尚知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11743
• 代理人: 吉海蓮;肖輔珍

本發(fā)明公開了一種腎纖維化標(biāo)志物miR?2682?5p，其可用于制備診斷、預(yù)防和/或治療腎纖維化的產(chǎn)品。本發(fā)明提供了用于檢測(cè)腎纖維化的診斷試劑盒。本發(fā)明還提供了用于預(yù)防和/或治療腎纖維化的藥物組合物，所述藥物組合物包含miR?2682?5p或其模擬物作為活性成分。本發(fā)明的腎纖維化標(biāo)志物miR?2682?5p能夠用于早期檢測(cè)腎纖維化風(fēng)險(xiǎn)或疾病狀態(tài)，并可用于基因治療、藥物治療等臨床應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及miR-2682-5p作為腎纖維化標(biāo)志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)

腎臟纖維化是一種病理生理改變，是腎臟的功能由健康到損傷，再到損壞，直至功能喪失的漸進(jìn)過程。腎臟由于受到創(chuàng)傷、感染、炎癥、血循環(huán)障礙，以及免疫反應(yīng)等多種致病因素刺激，其固有細(xì)胞受損，發(fā)展到后期出現(xiàn)大量膠原沉積和積聚，造成腎實(shí)質(zhì)逐漸硬化，形成瘢痕，直至腎臟完全喪失臟器功能。腎纖維化發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜，與多種因素有關(guān)，其中主要與細(xì)胞外基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞的增殖和活化、血管活性物質(zhì)、細(xì)胞因子以及細(xì)胞外基質(zhì)轉(zhuǎn)換失衡有關(guān)，腎間質(zhì)纖維化幾乎是所有原發(fā)或繼發(fā)腎臟疾病進(jìn)展到終末期腎衰竭的共同途徑。

miRNA(microRNA)是一類長(zhǎng)度為20～25個(gè)核苷酸的非編碼小分子RNA，通過影響其靶基因的穩(wěn)定性或抑制其翻譯轉(zhuǎn)錄水平來調(diào)控細(xì)胞的分化、增殖和凋亡。miRNA在細(xì)胞中表達(dá)失調(diào)會(huì)導(dǎo)致腎臟纖維化在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生，研究表明，一些miRNA在腎纖維化患者腎臟和尿液中異常表達(dá)，提示miRNA與腎纖維化的發(fā)生、發(fā)展有。因此，尋找與腎纖維化發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的miRNA，可以為臨床上診斷和治療腎纖維化提供有效的手段。

發(fā)明內(nèi)容

為了尋找與腎纖維化發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的miRNA，本發(fā)明一個(gè)目的在于提供一種腎纖維化的標(biāo)志物，所述標(biāo)志物為miR-2682-5p并具有SEQ ID NO:1(CAGGCAGUGACUGUUCAGACGUC)所示的核苷酸序列，所述腎纖維化標(biāo)志物可用于制備診斷、預(yù)防和/或治療腎纖維化的產(chǎn)品。

本發(fā)明還一個(gè)目的還在于提供診斷、預(yù)防和/或治療腎纖維化的產(chǎn)品。

本發(fā)明的發(fā)明人在對(duì)腎纖維化的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，miR-2682-5p在腎纖維化對(duì)象的腎組織或腎細(xì)胞中含量顯著降低，也即相對(duì)于未發(fā)生腎纖維化的對(duì)象來說腎纖維化對(duì)象腎組織或腎細(xì)胞中miR-2682-5p的相對(duì)表達(dá)水平下調(diào)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)miR-2682-5p能夠抑制靶基因twist的表達(dá)，使得受到twist抑制的E鈣粘蛋白E-cadherin和緊密連接蛋白Claudin的表達(dá)量增加，從而抑制引起腎纖維化的EMT途徑發(fā)生。twist基因是胚胎發(fā)育中起關(guān)鍵調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄因子，在誘導(dǎo)細(xì)胞移動(dòng)及組織塑形中起重要作用，twist可抑制E鈣粘蛋白E-cadherin和緊密連接蛋白Claudin表達(dá)而誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)，而EMT是腎小管間質(zhì)纖維化(tubular interstitial fibrosis,TIF)的關(guān)鍵發(fā)病機(jī)制。因此，施用miR-2682或其模擬物可以促進(jìn)E鈣粘蛋白E-cadherin和緊密連接蛋白Claudin表達(dá)，進(jìn)而有利于緩解和/或治療腎纖維化對(duì)象或患者的腎纖維化。

在本發(fā)明中，術(shù)語“對(duì)象”或“患者”指任意脊椎動(dòng)物，包括但不限于人和其他靈長(zhǎng)類(例如黑猩猩以及其他猿和猴類)、農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物(例如牛、綿羊、豬、山羊和馬)、家養(yǎng)哺乳動(dòng)物(例如狗和貓)、實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(例如家兔、嚙齒動(dòng)物如小鼠、大鼠和豚鼠)以及鳥(例如家禽或野生的鳥，如雞、火雞和其他鶉雞類、鴨、鵝等)。在一些實(shí)施方式中，所述對(duì)象或患者是哺乳動(dòng)物。在其他實(shí)施方式中，所述對(duì)象或患者是人。

在本發(fā)明中，術(shù)語“miR-2682-5p”是指包含SEQ ID No.1所示序列或其同源序列的miRNA，例如本領(lǐng)域中已知各種來源如人、鼠、兔等的miR-2682-5p。