[發明專利]一種測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法

在審

• 申請號: 201811230017.0
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN109324129A
• 公開（公告）日: 2019-02-12
• 發明（設計）人: 羅彥波;龐永強;陳小靜;朱風鵬;姜興益;張洪非;李翔宇
• 申請（專利權）人: 國家煙草質量監督檢驗中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 郭佳效

本發明涉及一種測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法。該方法包括以下步驟：1)向電子煙液樣品中加入提取溶劑和提取鹽進行提取，得到樣品提取液；2)將樣品提取液經黃曲霉毒素專用萃取柱進行固相萃取，之后用水清洗固相萃取后的黃曲霉毒素專用萃取柱的填料，再用甲醇或乙腈解吸，收集解吸液即為待測液；3)將待測液進行液相色譜?串聯質譜分析，即得。該測定方法利用黃曲霉毒素專用萃取柱進行固相萃取，使用純水清洗填料、甲醇解吸后制得待測液，該過程操作簡單，而且可有效去除基質干擾，采用液相色譜?串聯質譜法進行待測液分析，具有重現性好、靈敏度高的優點，進而可以實現電子煙液樣品中黃曲霉毒素的快速、高效測定。

技術領域

本發明屬于煙草化學檢驗技術領域，具體涉及一種測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法。

背景技術

黃曲霉毒素為二氫呋喃香豆素的衍生物，主要為黃曲霉寄生曲霉產生的次生代謝產物，多出現于濕熱環境下的糧食、食品和飼料中。黃曲霉毒素對人及動物肝臟組織有破壞作用，嚴重時可導致肝癌甚至死亡。黃曲霉毒素被世界衛生組織癌癥研究機構劃定為1類致癌物，是一種毒性極強的劇毒物質。黃曲霉毒素主要污染糧油食品和動植物食品等，常見的被污染對象有花生、玉米、大米、小麥、豆類、堅果類、肉類、乳及乳制品和水產品等。目前已經發現的黃曲霉毒素有20余種，根據其在紫外線照射下產生的熒光顏色不同，將其分為B族和G族兩大類及其衍生物。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見，其毒性和致癌性也最強，在玉米、花生、棉花種子、干果中常能檢測到黃曲霉毒素B1。因此，世界各國和組織均對各種食品中的黃曲霉毒素做了嚴格的限量標準，例如世界衛生組織規定的牛奶中黃曲霉毒素B1的最大允許量為0.5μg/kg。

電子煙(electrical cigarette,e-cigarette)是一種外形模仿卷煙的電子產品，其通過霧化含煙堿的煙液而讓使用者在吸食時產生一種類似抽煙的感覺。近年來，隨著國內外對傳統卷煙的管控措施不斷加強，電子煙取得了十足的發展，并且在國內外的產銷量都大幅增加。然而，迄今為止，國內外均沒有系統的電子煙安全性評估資料，且其安全性尚未得到充分的科學論證。因此，準確測定電子煙煙液中的成分顯得尤為重要。大多數電子煙液是通過在丙二醇和丙三醇中添加植物提取物、食用香精和煙堿(如需要)制成。因此，電子煙液在儲存、運輸和加工過程中，有可能會產生霉變，不僅會造成經濟損失，更重要的是會對產品的安全性造成影響。因此，電子煙液中黃曲霉毒素的測定顯得尤為重要。

公布號為CN104280503A的中國專利申請公開了一種同時測定煙草中黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2的HPLC-FLD柱前衍生法，其是將煙末樣品用甲醇溶液水浴超聲萃取后過濾，將濾液稀釋后通過免疫親和柱，用純水分兩次淋洗免疫親和柱，再用甲醇將免疫親和柱上富集的四種黃曲霉毒素洗脫下來，將洗脫液吹干后加入三氟乙酸和正己烷，在45℃恒溫衍生化40min，加入少量甲醇溶液，取下層溶液進行HPLC-FLD分析。該方法雖然實現了煙草中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的檢測，但電子煙液中黃曲霉毒素的含量較低，而且可能存在一定的基質干擾，該柱前衍生法的凈化效率和靈敏度并不能滿足電子煙液的檢測要求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法，從而解決現有測定方法的凈化效率和靈敏度較低的問題。

為實現上述目的，本發明的測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法的技術方案是：

一種測定電子煙液中黃曲霉毒素的方法，包括以下步驟：

1)向電子煙液樣品中加入提取溶劑和提取鹽進行提取，得到樣品提取液；所述提取溶劑為甲醇水溶液或乙腈水溶液；所述提取鹽為氯化鈉和/或氯化鉀；

2)將樣品提取液經黃曲霉毒素專用萃取柱進行固相萃取，之后用水清洗固相萃取后的黃曲霉毒素專用萃取柱的填料，再用甲醇或乙腈解吸，收集解吸液即為待測液；

3)將待測液進行液相色譜-串聯質譜分析，即得。