[發明專利]一種從雞血液中提取SOD和血紅素的聯產工藝在審
| 申請號: | 201811224015.0 | 申請日: | 2018-10-19 |
| 公開(公告)號: | CN111072771A | 公開(公告)日: | 2020-04-28 |
| 發明(設計)人: | 陳石良 | 申請(專利權)人: | 陳石良 |
| 主分類號: | C07K14/805 | 分類號: | C07K14/805;C12N9/02;C12N1/34;C12N1/14;C12N1/36 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 432600 湖北省*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 血液 提取 sod 血紅素 聯產 工藝 | ||
1.一種從雞血液中提取SOD和血紅素的聯產工藝,其特征在于,包括以下步驟:
(1)血球液制備:采集新鮮雞血,經抗凝處理后,離心分離,收集血紅細胞,即得到血球液;
(2)溶血:往血球液中加入其體積1倍的去離子水,不斷攪拌溶血60min,得到溶血液;
(3)熱變性反應Ⅰ:用 HCl調節溶血液PH 值至5.2,快速升溫至60℃,保溫60min,快速降溫至40℃以下,經板框壓濾機壓濾,分別收集濾液Ⅰ和血渣Ⅰ;
(4)熱變性反應Ⅱ:用NaOH調節濾液ⅠpH值至6.5,快速升溫至70℃,保溫20min后,快速降溫至40℃以下,經板框壓濾機壓濾,分別收集濾液Ⅱ和血渣Ⅱ;
(5)超濾濃縮:將收集的濾液Ⅱ經截留分子量為5000Da的超濾膜裝置超濾濃縮,濃縮至原體積的1/10,收集SOD粗酶液;
(6)純化:將SOD粗酶溶液加熱升溫至45℃,用NaOH調整PH值至9.0,并滴加SOD粗酶液總質量0.02%~0.05%的保護劑月桂酰氯,保溫反應1小時后,快速冷卻至20℃以下,6000r/min離心10min,收集上清液,用 HCl調整上清液PH值至6.5,6000r/min離心10min,收集上清液,即得藍綠色的SOD酶液;
(7)冷凍干燥:向SOD酶液中加入酶液重量2.0%的海藻糖,攪拌混合均勻后,冷凍干燥,得到淡藍綠色SOD凍干粉;
(8)抽提:取步驟(3)所得血渣Ⅰ和步驟(4)所得血渣Ⅱ,加入其體積5倍的酸性丙酮,攪拌30min,6000r/min離心10min,收集上清液;
(9)分離:調整步驟(8)所得上清液pH值至5.0,按加入1%的醋酸鈉,攪拌均勻后靜置30min,6000r/min離心10min,收集沉淀;
(10)干燥:將步驟(9)所得沉淀,用去離子水以及無水乙醇洗滌,在50℃-60℃下真空干燥,即得血紅素。
2.根據權利要求1所述的一種從雞血液中提取SOD和血紅素的聯產工藝,其特征在于:步驟(1)所述的離心分離是采用管式離心機連續分離,離心轉速大于16000r/min。
3.根據權利要求1所述的一種從雞血液中提取SOD和血紅素的聯產工藝,其特征在于:步驟(8)所述的酸性丙酮為3%(v/v)鹽酸丙酮溶液。
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