[發明專利]一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法

在審

• 申請號: 201811220413.5
• 申請日: 2018-10-19
• 公開（公告）號: CN109306326A
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 李益
• 申請（專利權）人: 四川金玉良種玉米抗性研發中心
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/77
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 曾凱

本發明屬于植物保護技術領域，公開了一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法，包括浸泡步驟：所述浸泡步驟包括將玉米用含有鐮孢菌菌絲的培養液浸泡后進行接種的步驟。本發明通過采用使用菌絲浸泡的方式進行擴繁接種體，大大節約了培養時間與培養空間；從而本發明具有培養成本低、培養時間短、占用空間小的特點。

技術領域

本發明屬于植物保護技術領域，具體涉及一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法。

背景技術

目前，莖腐病鐮孢菌擴繁采用的是將液體培養的鐮孢菌接種于高溫滅菌后玉米粒上，培養7-10d。每株玉米接種需要20-30g玉米粒，當接種1000份玉米材料(每份材料25株)，需要500公斤滅菌玉米粒，并恒溫培養7-10d，試驗室常規的滅菌鍋1次僅能滅30公斤玉米粒，因此，現在方法要占用大量的時間、空間與人力。大大限制了人工接種鑒定的數量。

發明內容

為了解決現有技術存在的上述問題，本發明目的在于提供一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法。

本發明所采用的技術方案為：

一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法，包括浸泡步驟：所述浸泡步驟包括將玉米用含有鐮孢菌菌絲的培養液浸泡后進行接種的步驟。

進一步的，所述浸泡步驟之前還包括含有鐮孢菌菌絲的培養液的制備步驟。

進一步的，所述含有鐮孢菌菌絲的培養液的制備步驟為：將鐮孢菌活化后接種在滅菌的PD液體培養基中培養用搖床將菌絲打碎后得到含有鐮孢菌菌絲的培養液。

進一步的，所述PD液體培養基滅菌的溫度為115℃-130℃，鐮孢菌在滅菌的PD液體培養基中培養的時間為60h-80h。

進一步的，所述浸泡步驟為：將玉米粒用水浸泡、煮沸后，得到浸泡玉米粒；加水沒過浸泡玉米粒，按照比例浸泡玉米粒：含有鐮孢菌菌絲的培養液＝100g：0.5mL-1.5mL向沒過浸泡玉米粒的水中加入含有鐮孢菌菌絲的培養液進行浸泡，得到鐮孢菌莖腐病接種體。

進一步的，所述浸泡步驟中玉米粒用水浸泡的時間為8h-16h；煮沸的時間為0.8-1.5h。

進一步的，所述含有鐮孢菌菌絲的培養液中每毫升含有的菌絲段為10⁵個/mL—10⁶個/mL。

進一步的，向沒過浸泡玉米粒的水中加入含有鐮孢菌菌絲的培養液進行浸泡的時間為8-15h。

本發明的有益效果為：本發明的一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法，首次采用菌絲浸泡的方式進行擴繁接種體，大大節約了培養時間和培養空間；相比傳統的制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法本發明占用時間、空間與人力均要小的多；相比傳統的制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法，本發明具有培養時間短、效率高的特點；因為本發明無需對玉米滅菌從而本發明節省了現有的對玉米粒滅菌的步驟，而該步驟往往需要耗費大量的人力物力，從而本發明具有顯著的人力物力優勢。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步闡釋。

一種快速制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法，包括浸泡步驟：所述浸泡步驟包括將玉米用含有鐮孢菌菌絲的培養液浸泡后進行接種的步驟。

現有的制備鐮孢菌莖腐病接種體的方法采用將液體培養的鐮孢菌接種于高溫滅菌后玉米粒上，培養7-10d。該方式一方面培養的時間較長；另一方面需要對大量的玉米粒進行滅菌操作，除了需要消耗大量的能源以外，也需要耗費大量的人力物力。從而大大限制了人工接種的數量。