[發明專利]一種制備聚唾液酸的方法

有效

• 申請號: 201811219956.5
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN109266707B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 李翔宇;劉洋;陳祥松;吳金勇
• 申請（專利權）人: 武漢中科光谷綠色生物技術有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12R1/19
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 舒暢

本發明公開了一種制備聚唾液酸的方法，涉及聚唾液酸制備技術領域。該制備聚唾液酸的方法包括：在發酵過程中，往接種有產聚唾液酸菌的發酵培養基中添加對聚唾液酸具有吸附、絡合或耦合能力的分離劑。該制備方法對聚唾液酸具有吸附、絡合或耦合能力的分離劑，在發酵的過程中添加上述分離劑，使發酵液產生的聚唾液酸從發酵液中被吸附、絡合或耦合，降低其在發酵液中的濃度，達到刺激菌體加速產生聚唾液酸的目的，實現聚唾液酸產量的增加。

技術領域

本發明涉及聚唾液酸制備技術領域，具體而言，涉及一種制備聚唾液酸的方法。

背景技術

聚唾液酸(polysialic acid，PSA)是一類線性、均一多聚α2,8連接唾液酸的獨特碳水化合物，它主要通過典型的N-連接糖苷鍵附著在脊椎動物神經系統神經黏附分子上。多聚唾液酸通過改變神經系統神經黏附分子的黏附性調節神經細胞發育、神經導向以及突觸形成，從而在神經發育中起關鍵作用。

聚唾液酸經水解后可得到唾液酸寡糖和唾液酸單體，可用于進一步制備功能性唾液酸寡糖的原料。聚唾液酸還可用作蛋白藥物的緩釋材料和神經修復手術中的支架材料。蛋白質類藥物已經成為現代生物制藥領域一個重要的組成部分。

現有的生產聚唾液酸的方法主要是采用發酵培養，從培養產物中分離純化得到聚唾液酸。但目前的發酵培養方法生產聚唾液酸的含量低。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種制備聚唾液酸的方法，采用該制備方法可以提高發酵產物中的聚唾液酸含量。

本發明是這樣實現的：

一種制備聚唾液酸的方法，其包括：在發酵過程中，往接種有產聚唾液酸菌的發酵培養基中添加對聚唾液酸具有吸附、絡合或耦合能力的分離劑。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述分離劑為陽離子表面活性劑、陽離子絮凝劑或樹脂。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述陽離子表面活性劑為十六烷基三甲基季銨溴化物、十八烷基二甲基芐基季銨氯化物。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述陽離子表面活性劑為十六烷基三甲基溴化銨。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述陽離子表面活性劑為氯代十六烷基吡啶。

進一步地，在本發明地一些實施方式中，上述陽離子絮凝劑為陽離子聚丙烯酰胺。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述樹脂為大孔吸附樹脂，進一步地，上述大孔吸附樹脂為（甲基）丙烯酰氧乙基三甲基氯化銨與丙烯酰胺的共聚物（DMC-AM）。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，在接種產上述聚唾液酸菌后的第12~15h、第22~25h和第32~35h分三次添加上述分離劑。

在上述的三個時間段時添加分離劑，聚唾液酸積累速率最高，相對吸附效率最高。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，每次上述分離劑的添加量為1%-3%。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，上述產聚唾液酸菌為大腸桿菌，保藏編號為CCTCC No.M 2018103。

進一步地，在本發明的一些實施方案中，在接種上述產聚唾液酸菌時，上述發酵培養基含有：磷酸二氫鉀8-12g/L，玉米漿干粉3-5g/L，蛋白胨3-5g/L，酵母浸粉1.8-2.2g/L，葡萄糖28-32g/L。

生物反應過程的反應速率往往隨著產物或某些副產物的積累而受到抑制，在反應過程中及時地分離出這些產物能夠解除抑制作用，從而提高產物生物速率或使平衡能夠解除抑制作用，從而提高產物生產速率或使平衡向有利于產物生成方向轉移，從而提高底物利用率和產物產量。