[發明專利]一種超高效親水色譜快速測定吸煙者尿液中肌酐和尿酸的方法

在審

• 申請號: 201811218030.4
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN108982721A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 李雪梅;李晶;曾婉俐;楊光宇;楊葉昆;劉欣;向海英;許力;蔣佳芮;鄧樂樂;宋春滿;田麗梅
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京市領專知識產權代理有限公司 11590
• 代理人: 任文娟;陳有業

1.一種超高效親水色譜快速測定吸煙者尿液中肌酐和尿酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)標準工作曲線的建立：配制標準工作液，利用超高效親水色譜分析并建立標準工作曲線；

(2)收集尿液樣品，并進行前處理；

(3)利用超高效親水色譜對步驟(2)經過前處理后的尿液樣品進行檢測，根據步驟(1)建立的標準曲線計算吸煙者尿液樣品中肌酐和尿酸含量。

2.根據權利要求1所述的超高效親水色譜快速測定吸煙者尿液中肌酐和尿酸的方法，其特征在于，步驟(1)包括如下具體步驟：

準確稱取肌酐和尿酸標準品各0.1g，用乙腈溶解并定容至100mL容量瓶中，得到1.0mg/mL的混合標準儲備液；使用時分別取5.0、2.5、1.0、0.5、0.1、0.05、0.025mL的該混合標準儲備液于10mL的容量瓶中，用乙腈定容到刻度并搖勻，得濃度分別為：500、250、100、50、10、5.0、2.5μg/mL的標準工作液，利用超高效親水色譜分析并建立標準工作曲線。

3.根據權利要求1所述的超高效親水色譜快速測定吸煙者尿液中肌酐和尿酸的方法，其特征在于，步驟(2)中尿液樣品的前處理包括：樣品統一采集清晨空腹尿液，每位志愿者收集中間部分15～30mL尿液，尿液樣品采集后，立即準確移取1.0mL于萃取瓶中，用50％乙腈定容到10mL，過濾、轉移，棄去最初的2-3mL，然后用色譜進樣瓶收集1-1.5mL的萃取溶液，待測。

4.根據權利要求1所述的超高效親水色譜快速測定吸煙者尿液中肌酐和尿酸的方法，其特征在于，步驟(3)中超高效親水色譜的條件為：

色譜柱為Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC液相色譜柱(50×2.1mm,1.7μm)，流動相為70％乙腈(內含0.1％磷酸二氫氨)，流速0.5mL/min，檢測波長235nm，進樣體積5.0μL，柱溫30℃。