[發明專利](S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇的生物制備方法

有效

• 申請號: 201811216899.5
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN111073912B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 陳少欣;張福利;湯佳偉;衛騰云;倪國偉
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12N9/04
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐迅;崔佳佳

1.一種制備(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇的方法，其特征在于，包括步驟：

(a)在液態反應體系中，以式II化合物為底物，在輔酶存在下，在羰基還原酶催化下，進行不對稱還原反應，從而形成式I化合物，即(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇；

其中，所述反應體系中，式II化合物濃度為30-500g/L；和

(b)任選地從所述上一步驟的反應后的反應體系中分離出式I化合物；

其中，所述羰基還原酶為氨基酸序列選自下組的酶：SEQ ID NO:2、3、4、5、6、7或8。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反應體系中，羰基還原酶的存在形式選自下組：羰基還原酶為游離形式的酶、固定化酶、或菌體形式的酶。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(b)中，所述反應后的反應體系中，(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇的ee值≥90％。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(b)中，所述反應后的反應體系中，≥80％式II化合物被轉化為(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中，所述反應后的反應體系中，式I化合物的濃度為30-500g/L。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述羰基還原酶的氨基酸序列為SEQ ID NO:5。

7.一種反應體系，其特征在于，所述反應體系包括：

(i)水性溶劑；

(ii)底物，所述底物為式II化合物；

(iii)輔酶；

(iv)羰基還原酶；所述羰基還原酶為氨基酸序列選自下組的酶：SEQ ID NO:2、3、4、5、6、7或8；

(v)共底物；和

(vi)用于輔酶再生的酶。

8.如權利要求7所述的反應體系，其特征在于，在所述的反應體系中，式Ⅱ化合物濃度為30～500g/L。

9.一種制備(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇的方法，其特征在于，包括步驟：使用如權利要求8所述的反應體系，在適合酶催化的條件下，進行酶促反應，從而制得(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇，即式I化合物：

10.一種羰基還原酶，其特征在于，所述羰基還原酶選自下組：

(i)來源于Lactobacillus kefiri的羰基還原酶LKCR，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2、3、4、5、6、7或8所示。

11.一種如權利要求10所述的羰基還原酶的用途，其特征在于，用于在液態反應體系中，以式II化合物為底物，在輔酶存在下，催化不對稱還原反應，從而形成式I化合物，即(S)-2-氯-1-(2,4-二氯苯基)乙醇：