[發(fā)明專利]一種紅花組織的快速繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811216351.0
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN109042340B
• 公開（公告）日: 2020-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 覃瑞;趙玲玲;劉虹;唐思;馬夢雪;張丹丹;張麗;李剛
• 申請（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈

1.一種紅花組織的快速繁殖方法，具體步驟為:

(1).無菌苗培養(yǎng)：將紅花種子在生苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得無菌苗；

(2).愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)：取無菌苗的莖段作為外植體，在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，獲得愈傷組織，所述愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基包含Phytagel、6-BA、NAA和PVP；

(3).繼代生苗培養(yǎng)：將愈傷組織在再分化繼代培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，獲得不定苗，所述再分化繼代培養(yǎng)基包含Phytagel、6-BA、NAA和PVP；

(4).生根培養(yǎng)：將不定苗插入生根培養(yǎng)基中，進行生根培養(yǎng)，所述生根培養(yǎng)基包含Phytagel、IBA和PVP

(5).馴化移栽；

所述愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基的成分為：MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 2.0mg/L、NAA1.8mg/L；所述再分化繼代培養(yǎng)基成分為：MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 0.15mg/L、NAA 4.0mg/L；所述Phytagel為G3251；所述生根培養(yǎng)基的成分為MS、IBA 0.12mg/L、3g/LPhytagel和3g/L PVP。

2.權(quán)利要求1所述的紅花組織的快速繁殖方法，其特征在于，所述紅花組織的快速繁殖方法，具體步驟為:

(1)無菌苗培養(yǎng)：選取-20℃保存的紅花種子，自來水常溫泡發(fā)，篩選飽滿的種子；吸水紙吸干表面水分備用；超凈工作臺內(nèi)用質(zhì)量分數(shù)為0.1％的升汞消毒，然后用無菌水漂洗5-8次至無消毒劑殘留；用鑷子夾取清洗好的種子，放置在滅菌過的接種碟上，用菌過的濾紙吸干表面水分；最后將種子接于滅菌過的培養(yǎng)基中，所述培養(yǎng)基的成分為：MS、3g/LPhytagel，PH：5.75；培養(yǎng)條件：溫度24-26℃，光照強度：3000-5000lx，光照時間16h/d，在光照培養(yǎng)箱中無菌培養(yǎng)；

(2)愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)：取8天苗齡的無菌苗,用鑷子夾取放置于接種碟上，手術(shù)刀切取莖段，放置于滅菌后的愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 2.0mg/L、NAA 1.8mg/L；培養(yǎng)條件：溫度24-26℃，光照強度：3000-5000lx，光照時間16h/d，在光照培養(yǎng)箱中無菌培養(yǎng)21天；

(3)繼代生苗培養(yǎng)：取培養(yǎng)21天后的愈傷組織，轉(zhuǎn)入滅菌后的再分化繼代培養(yǎng)基中，分化繼代培養(yǎng)基為：MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 0.15mg/L、NAA 4.0mg/L，PH：5.75-5.85；培養(yǎng)條件：溫度24-26℃，光照強度：3000-5000lx，光照時間16h/d，在光照培養(yǎng)箱中無菌培養(yǎng)12天；

(4)生根培養(yǎng)：在無菌條件下，將再分化得到的不定苗切去愈傷組織細胞，插入生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基的成分為MS、吲哚乙酸(IBA)0.12mg/L、3g/L Phytagel和3g/LPVP；培養(yǎng)條件：溫度24-26℃，光照強度：3000-5000lx，光照時間16h/d；

(5)馴化移栽：當(dāng)經(jīng)過生根培養(yǎng)后的生根試管苗高5-10cm時，將組培苗進行室內(nèi)煉苗，煉苗溫度為24-26℃，光照強度5000-10000lx，光照時間16h/d，室內(nèi)敞瓶口煉苗2天；取出試管苗，移栽到用多菌靈滅菌過的土壤和蛭石，按照1:1的比例做基質(zhì)的盆栽缽中，澆足水，光照強度：5000-10000lx，光照時間16h/d，2周后室外培養(yǎng)，保證水分充足。

3.一種可以誘導(dǎo)紅花莖稈產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)基的用途，其特征在于，所述培養(yǎng)基的成分為MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 2.0mg/L、NAA 1.8mg/L，所述培養(yǎng)基可以誘導(dǎo)紅花莖稈產(chǎn)生愈傷組織。

4.一種可以誘導(dǎo)紅花愈傷組織分化生苗的培養(yǎng)基的用途，其特征在于，所述培養(yǎng)基的成分為MS、Phytagel 3g/L、PVP 3g/L、6-BA 0.15mg/L、NAA 4.0mg/L，所述紅花愈傷組織由紅花的莖段作為外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生，所述培養(yǎng)基可以誘導(dǎo)紅花愈傷組織分化生苗。