[發明專利]化學發光底物液及其應用

在審

• 申請號: 201811215406.6
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN109490281A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 劉挺;鄧月月;姚天成
• 申請（專利權）人: 深圳天深醫療器械有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/533
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 潘霞

本發明涉及一種化學發光底物液。該化學發光底物液包括如下組分：150mg/L的(4?氯苯巰基)(10?甲基?9,10?二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽、10mmol/L?500mmol/L的緩沖基質、0.1mg/L?20mg/L的熒光增強物質、10mg/L?5000mg/L的本底發光抑制物質及0.1g/L?10g/L的表面活性劑；化學發光底物液的pH為8?11，本底發光抑制物質為具有弱還原性的無機還原劑或者具有弱還原性的有機還原劑，表面活性劑為非離子表面活性劑與陰離子表面活性劑的混合物或者為非離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的混合物。上述化學發光底物液達到發光平臺期時間短、發光持續時間長，檢測靈敏度高且光穩定性好，可以提高臨床免疫檢測速度，縮短檢測時間。

技術領域

本發明涉及化學發光免疫分析技術領域，特別是涉及一種化學發光底物液及其應用。

背景技術

化學發光免疫分析技術因具有靈敏度高，檢測線性范圍寬、操作簡單、檢測時間短、易于自動化處理等特點，已成為免疫診斷領域廣泛使用的免疫分析技術。化學發光分為直接化學發光、酶促(間接)化學發光和電化學發光。酶促化學發光免疫分析技術建立在酶免疫反應及化學發光基礎之上，免疫反應原理與酶聯免疫(EIA)、放射免疫(RIA)相似，不同之處在于信號的產生和檢測。免疫反應完成后，發光底物在酶催化作用下，形成激發態的中間體，該中間體不穩定，在回復到基態的過程中會輻射光子，通過光信號測量儀器測量相對發光強度，可以推算出待檢測物質的濃度。

堿性磷酸酶(ALP)在酶促化學發光免疫分析中應用比較廣泛，目前使用最多的堿性磷酸酶發光底物是1,2-二氧環己烷衍生物，如CDP-star、AMPPD等，此類發光底物屬于輝光型，達到發光平臺期時間長，通常大于20分鐘。相關技術中還有以9，10-二氫吖啶衍生物為發光底物的APS-5堿性磷酸酶底物液，該底物達到發光平臺期時間雖然比上述1,2-二氧環己烷衍生物發光底物的達到發光平臺期時間短，但是該底物本底信號較高、穩定性較差，且價格昂貴。

發明內容

基于此，有必要提供一種達到平臺期時間短、檢測靈敏度高且穩定性好的化學發光底物液。

此外，還提供化學發光底物液的應用。

一種化學發光底物液，包括如下組分：

150mg/L的(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽、10mmol/L-500mmol/L的緩沖基質、0.1mg/L-20mg/L的熒光增強物質、10mg/L-5000mg/L的本底發光抑制物質及0.1g/L-10g/L的表面活性劑；

所述化學發光底物液的pH為8-11，所述本底發光抑制物質為具有弱還原性的無機還原劑或者具有弱還原性的有機還原劑，所述表面活性劑為非離子表面活性劑與陰離子表面活性劑的混合物或者為非離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的混合物。

上述化學發光底物液中，采用(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽作為堿性磷酸酶底物，緩沖基質具有維持pH、增加穩定性的作用；熒光增強物質能夠使底物液發光信號增強，從而可以提升檢測靈敏度；具有弱還原性的本底發光抑制物質能夠降低本底信號值，從而提升檢測靈敏度；非離子表面活性劑與陰離子表面活性劑復配的表面活性劑，及非離子表面活性劑與陽離子表面活性劑復配的表面活性劑能夠改善溶液分散性，使底物液發光信號增強，從而提升檢測靈敏度，同時還能使底物液產生持續、穩定的發光信號；通過將上述(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽、緩沖基質、熒光增強物質、本底發光抑制物質及的表面活性劑以一定的配比進行混合，能夠使化學發光底物液的發光效率快、達到發光平臺期時間短，發光持續時間長、檢測靈敏度高且光穩定性好，從而可以提高臨床免疫檢測速度，縮短檢測時間。

在其中一個實施例中，所述緩沖基質選自三羥甲基氨基甲烷、2-氨基-2-甲基-1-丙醇及4-羥乙基哌嗪乙磺酸中的一種。