[發(fā)明專利]能大量富集糖蛋白的核殼式硼基化磁性微球的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811213291.7
• 申請(qǐng)日: 2018-10-18
• 公開（公告）號(hào): CN109225084B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱飛飛;楊書彬;馬建軍;陳飛;李林;渠海;鄭業(yè)煥;付光宇;吳學(xué)煒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號(hào): B01J13/14
• 分類號(hào): B01J13/14
• 代理公司: 鄭州異開專利事務(wù)所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

1.一種能大量富集糖蛋白的核殼式硼基化磁性微球的制備方法，其特征在于：所述磁性微球的內(nèi)核為四氧化三鐵磁性納米微粒，外殼為富含氨基的交聯(lián)聚合物網(wǎng)絡(luò)，在其表面采用氨基基團(tuán)和羧基苯硼酸酯酰胺化反應(yīng)進(jìn)行修飾；其具體步驟如下：第一步，以六水合三氯化鐵、醋酸鹽為原料，采用溶劑熱法制備納米四氧化三鐵磁性微粒；

第二步，采用溶膠凝膠法將納米四氧化三鐵磁性微粒表面包覆一層SiO₂；

第三步，將第二步得到的四氧化三鐵@SiO₂納米磁性復(fù)合微球分散在10mL純化水、40mL乙醇和25wt%的2mL氨水中；接著，在攪拌條件下，將0.5mL硅烷偶聯(lián)劑KH570加入上述分散相中，將分散相于反應(yīng)溫度50℃下繼續(xù)機(jī)械攪拌12小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后，采用磁分離得到乙烯基修飾的四氧化三鐵@二氧化硅納米磁性復(fù)合微粒，并用純化水和無水乙醇洗去過量的硅烷偶聯(lián)劑；最后放在真空干燥箱干燥；

第四步，將乙烯基修飾的四氧化三鐵@二氧化硅納米磁性復(fù)合微粒加入到三頸燒瓶中，加入8mL乙醇、60mL純化水、12mg十二烷基苯磺酸鈉，機(jī)械攪拌30分鐘，接著加入過硫酸鉀水溶液、丙烯胺，接著機(jī)械攪拌15分鐘，然后將燒瓶轉(zhuǎn)入60℃油浴反應(yīng)8小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后用磁分離，并用乙醇和純化水進(jìn)行洗滌，得到四氧化三鐵@二氧化硅@聚丙烯胺納米磁性復(fù)合微粒；

第五步，將第四步得到的磁性復(fù)合微球分散在二甲基亞砜中配制成固含量為100mg/mL的分散液；取1mL分散液于離心管中，超聲，加入30mg/mL的EDC的二甲基亞砜溶液、1mL的30mg/mL的NHS的二甲基亞砜溶液，將離心管置于垂直混合儀上混合20分鐘，加入5mL的20mg/mL的4-羧基苯硼酸酯的二甲基亞砜溶液，最后將離心管置于垂直混合儀室溫反應(yīng)12小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后用磁分離，并用二甲基亞砜洗滌，得到核殼式四氧化三鐵@二氧化硅@聚丙烯胺-羧基苯硼酸酯磁性復(fù)合微球。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的能大量富集糖蛋白的核殼式硼基化磁性微球的制備方法，其特征在于：所述第一步中所用的醋酸鹽為醋酸鋰、醋酸鈉、醋酸鉀、醋酸鎂或醋酸銨中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的能大量富集糖蛋白的核殼式硼基化磁性微球的制備方法，其特征在于：所述第三步在對(duì)包覆有SiO₂的磁性微球表面修飾乙烯基官能團(tuán)過程中，采用了含有雙鍵的硅烷偶聯(lián)劑KH570。