[發明專利]藤梨根中單體化合物的制備方法及其在制備抗腫瘤藥物的應用

有效

• 申請號: 201811210022.5
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN111057033B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 王向東;張雪梅;程能能;鎮曉諾;張繡雯
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;C07D307/80;C07H15/203;C07H1/08;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發明屬于醫藥技術領域，涉及藤梨根提取物的制備方法，具體涉及藤梨根提取物中單體化合物的制備及其在抗腫瘤方面的醫藥用途。本發明單體化合物的制備方法包括：干燥藤梨根用蒸餾水煎煮提取，提取液經煎煮濃縮、冷凍真空干燥得到水提物；將藤梨根提取液進行大孔樹脂柱色譜分離，使用水?乙醇體系梯度洗脫，合并濃縮后得到亞組分A?E；對亞組份C進行凝膠柱色譜柱分離得到13個組分Z1?Z13；用制備型高效液相色譜對所述餾分分離純化得到4個單體化合物，經鑒定其結構分別為：秦皮素(1)、(7S,8R)?二氫脫氫二松柏醇4?O?β?D?吡喃葡萄糖苷(2)、二氫去氫二愈創木基醇(3)和白蠟樹素(4)。本發明的藤梨根水提物中單體可用于治療腫瘤的藥物。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及藤梨根提取物的制備方法，具體涉及藤梨根提取物中單體化合物的制備及其在抗腫瘤方面的醫藥用途。

背景技術

現有技術公開了藤梨根為獼猴桃科植物中華獼猴桃(Actinidia chinensis)的根，是中國特有的品種，主要分布在中國東部地區。資料記載，中華獼猴桃全株均可藥用，中醫認為其根氣微，味苦、澀，具有清熱解毒，活血消腫，祛風利濕之功效；其作為一種治療腫瘤的中藥材已經在臨床使用近30年，民間用其治療胃癌、鼻咽癌、乳腺癌等；實踐顯示，其對于改善癌癥患者身體功能有良好的作用，可有效的提高患者自身抵抗腫瘤的能力，提高治療腫瘤的效果。臨床實踐中藤梨根湯劑治療消化道癌癥是常規中藥處方。

近年來，通過國內外對藤梨根提取物抗腫瘤作用的研究表明，藤梨根中含有多種生物活性成分；如，李昊等采用四甲基氮唑鹽比色法(MTT法)觀察藤梨根不同濃度和不同作用時間對胃癌細胞的抑制作用，結果顯示藤梨根原液藥物濃度經過稀釋4倍以后，抑制腫瘤的效果達到88.19％(李昊等，藤梨根對胃癌細胞抑制作用的實驗研究，河北中醫,2004,26(04):314-315.)；國宏莉等通過MTT法測定藤梨根正丁醇提取液的抗食管癌Eca-109細胞的生長作用，其生長抑制率可達87.2％(國宏莉等，藤梨根正丁醇提取物在人食管癌細胞生長中的作用，中藥材,2008,31(07):1030-1032.)；單建貞等研究發現藤梨根中熊果酸能夠對表皮生長因子(EGFR)表達陽性的結腸癌細胞起到生長抑制作用，結果顯示藤梨根有效成分熊果酸能夠抑制結腸癌細胞增殖及其誘導凋亡作用(單建貞，藤梨根有效成分對結腸癌細胞增殖抑制作用及相關機制的研究，浙江大學,2010)；除此之外，王嵐等發現藤梨根正丁醇提取物能夠對肺癌A549細胞有抑制作用，提取物濃度為1.25,0.625g/L，可以使G0/G1期出現阻滯(王嵐等，藤梨根正丁醇提取物和總黃酮苷抗腫瘤作用研究，中國中藥雜志,2010,35(16):2184-2186)，等等。

現有的藤梨根提取物的制備方法中提取工藝大多是先采用有機溶劑進行浸提，然后通過乙酸乙酯和正丁醇的進行萃取，然后再利用石油醚-丙酮，氯仿-甲醇或者聚酰胺進行洗脫，最后再通過純化手段得到藤梨根單體成分，該提取工藝忽視了臨床使用中藥的常規方式，所得到的提取物或者單體成分是否能在臨床使用中發揮療效尚不明確，其抗癌的成分和機理還需要進一步研究。

基于現有技術的現狀，本申請的發明人擬提供藤梨根提取物新的的制備方法，具體涉及藤梨根提取物中單體化合物的制備及其在抗腫瘤方面的醫藥用途。

發明內容

本發明的目的在于基于現有技術的現狀，提供藤梨根提取物新的的制備方法，具體涉及藤梨根提取物中單體化合物尤其是其中四個單體化合物的制備及其在抗腫瘤方面的醫藥用途。

具體的，本發明提供了藤梨根提取物中單體化合物制備方法，尤其是藤梨根水提物中四個單體化合物的分離純化方法及其用途，本發明藤梨根中單體化合物具有抑制腫瘤細胞的作用。

本發明藤梨根水提物中單體化合物為如下結構式的秦皮素(1)、(7S,8R)-二氫脫氫二松柏醇4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、二氫去氫二愈創木基醇(3)、白蠟樹素(4)：