[發明專利]γ-六溴環十二烷對映體植物毒性的評價方法

在審

• 申請號: 201811208946.1
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109164189A
• 公開（公告）日: 2019-01-08
• 發明（設計）人: 武彤;田柳;崔建升;尹姍姍
• 申請（專利權）人: 河北科技大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 王政

本發明涉及持久性有機污染物毒性評價技術領域，具體公開一種γ?六溴環十二烷對映體植物毒性的評價方法，即將植物的種子和幼苗分別在不同濃度的γ?六溴環十二烷對映體溶液中進行暴露，測定暴露后種子的發芽率，測定幼苗根部及地上部中抗壞血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量。本發明方法周期短，操作簡單，通過測定種子萌發抑制率、抗壞血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量，能有效比較出(+)γ?HBCD與(rac)γ?HBCD對植物毒性的差異以及γ?HBCD對不同植物的毒性水平。

技術領域

本發明涉及持久性有機污染物毒性評價技術領域，具體涉及一種γ-六溴環十二烷對映體植物毒性的評價方法。

背景技術

六溴環十二烷(HBCD)是一種新型溴代阻燃劑，由于其效果好、用量少被廣泛應用于紡織業、電子產業及建筑業。HBCD可導致血清甲狀腺激素濃度下降、引起肝組織病理學改變，并且具有致畸、致癌的潛力。2013年，斯德哥爾摩公約將其列入持久性有機污染物(POPs)受控名單中，HBCD在環境領域已備受關注。HBCD除了具有POPs持久性、生物積累性、高毒性以及遠距離遷移性的特征外還具有手性特征。工業生產的技術級HBCD(tHBCD)是一種化學混合物，其中主要含有α-HBCD、β-HBCD和γ-HBCD三種異構體(其中以γ-HBCD為主，占75％-89％)，每一種異構體又分別含有一對對映體。

目前對HBCD毒性研究大多集中在細胞以及動物中，且研究多停留在結構異構體水平上的考察，有關HBCD對植物的毒性尤其在對映體水平上的毒性研究目前較少，導致對其環境風險評估存在偏差。植物是生態系統能量的生產者，研究HBCD對植物的毒性效應，更易于了解HBCD進入生態系統后所產生的影響，為進一步深入探討HBCD的生態毒理奠定基礎。

發明內容

針對現有技術對六溴環十二烷(HBCD)對映體對植物生理代謝的影響評估方法容易存在偏差等問題，本發明提供一種γ-HBCD對映體植物生理代謝毒性的評價方法，由于(+)γ-HBCD與(-)γ-HBCD相比更易在生物體中富集，且前期研究考察已發現(-)γ-HBCD對植物的毒性與空白相比差異不大，因此本發明方法用于評價(+)γ-HBCD與(rac)γ-HBCD對植物代謝的毒性大小。

為達到上述發明目的，本發明采用了如下的技術方案：

一種γ-HBCD對映體植物毒性的評價方法，其步驟為：將植物的種子和幼苗分別在不同濃度的γ-HBCD對映體溶液中進行暴露，測定暴露后種子的發芽率，測定幼苗根部及地上部中抗壞血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量。

優選地，所述γ-HBCD對映體溶液設置五個濃度梯度，分別為0.5、1.0、2.0、3.0和5.0μg·L^-1。

優選地，所述種子和幼苗在γ-HBCD對映體溶液中暴露的時間為3d。

進一步優選地，所述暴露過程中，每天光照14h，白天溫度25℃，夜晚溫度20℃。

優選地，所述種子胚根和胚芽鞘長度都超過種子長度的一半時即認為發芽。

優選地，所述幼苗為發芽4d后的幼苗。

優選地，所述幼苗根部和地上部分別加入三氯乙酸，冰浴研磨至勻漿狀，離心，檢測上清液中的抗壞血酸、谷胱甘肽和丙二醛的含量。

進一步優選地，所述離心是在4℃、5000xg下離心15min。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：