[發(fā)明專利]RPRM基因及其表達(dá)產(chǎn)物的新用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811208558.3
• 申請(qǐng)日: 2018-10-17
• 公開（公告）號(hào): CN109517896A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊紅英;張雅瑞;張力元
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 關(guān)旭穎

本發(fā)明涉及RPRM基因及其表達(dá)產(chǎn)物的新用途。具體地，本發(fā)明涉及基因Reprimo(RPRM)及其表達(dá)產(chǎn)物抑制DNA損傷修復(fù)通路、增加腫瘤細(xì)胞放射敏感性的新功能。更具體涉及其在臨床腫瘤放療增敏輔助治療中的應(yīng)用。RPRM對(duì)腫瘤細(xì)胞的增敏效應(yīng)是由于它抑制了DNA損傷修復(fù)通路的核心上游蛋白ATM，通過降低ATM的表達(dá)水平從而抑制其活化水平及活化后誘導(dǎo)激活的下游一系列DNA損傷修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)，由此抑制了非同源末端連接和同源重組兩條主要的DNA損傷修復(fù)通路，降低了細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)能力，使得DNA雙鏈斷裂更加嚴(yán)重、細(xì)胞對(duì)射線敏感性更高。通過上調(diào)腫瘤病人腫瘤細(xì)胞RPRM表達(dá)水平，可以達(dá)到增加腫瘤放療增敏的目的，從而作為腫瘤病人放療的有效輔助手段。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因Reprimo(RPRM)及其表達(dá)產(chǎn)物的新用途。更具體涉及其在腫瘤放療增敏輔助治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

Reprimo(RPRM)是一個(gè)受p53調(diào)控激活繼而參與調(diào)控細(xì)胞周期的抑癌基因。其蛋白表達(dá)產(chǎn)物被高度糖基化修飾并主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。RPRM作為一個(gè)抑癌基因，通過引發(fā)細(xì)胞周期阻滯、抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等多重機(jī)制參與調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞遷移，在調(diào)節(jié)細(xì)胞和組織的動(dòng)態(tài)平衡包括增殖、遷移、細(xì)胞存活等的信號(hào)通路中起著重要作用。研究表明RPRM可抑制Cdc2的表達(dá)從而抑制細(xì)胞周期蛋白CyclinB1的核轉(zhuǎn)運(yùn)，引發(fā)細(xì)胞周期G2/M期阻滯。在包括胃癌、乳腺癌、垂體腺癌、結(jié)直腸癌等眾多癌癥中，由于RPRM啟動(dòng)子的高度甲基化，導(dǎo)致其在腫瘤組織中低表達(dá)甚至缺失，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和遷移。另一方面，上調(diào)RPRM在這些腫瘤組織中的表達(dá)水平后，腫瘤的生長(zhǎng)和遷移均受到明顯抑制，進(jìn)一步證明RPRM是一個(gè)抑癌基因，且這些腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與RPRM的低表達(dá)有很大關(guān)系。但RPRM在肺癌中的表達(dá)水平以及其啟動(dòng)子的甲基化程度尚不清楚。由于RPRM受p53調(diào)控，而p53又參與調(diào)控細(xì)胞DNA損傷修復(fù)相關(guān)通路，同時(shí)RPRM可受到DNA損傷的誘導(dǎo)激活，因此預(yù)測(cè)RPRM或許參與DNA損傷修復(fù)相關(guān)通路的應(yīng)答效應(yīng)。但是，RPRM調(diào)控DNA損傷修復(fù)通路和增加腫瘤細(xì)胞放射敏感性的作用至今未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題是提供一種RPRM基因在腫瘤治療中的用途，通過上調(diào)RPRM的表達(dá)水平作為腫瘤病人放療的有效輔助手段。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的一個(gè)技術(shù)方案是：提供一種RPRM基因在腫瘤治療中的用途，所述RPRM基因功能抑制DNA損傷修復(fù)通路，增加腫瘤細(xì)胞的放射敏感性。

本發(fā)明還提供了RPRM基因在制備腫瘤細(xì)胞放療增敏劑中的應(yīng)用。

所述放療增敏劑包括攜帶RPRM基因的載體。在一些實(shí)施方案中，所述放療增敏劑包括攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒或其它藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明還提供了RPRM基因在制備腫瘤細(xì)胞放療增敏試劑盒中的應(yīng)用。

所述腫瘤細(xì)胞放療增敏試劑盒包含攜帶RPRM基因的載體，在一些實(shí)施方案中，所述腫瘤細(xì)胞放療增敏試劑盒包含攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒或其它藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明還提供了上調(diào)RPRM基因表達(dá)的試劑在制備腫瘤細(xì)胞放療增敏劑或腫瘤細(xì)胞放療增敏試劑盒中的應(yīng)用。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述上調(diào)RPRM基因表達(dá)的試劑是攜帶RPRM基因的載體。在一些實(shí)施方案中，所述上調(diào)RPRM基因表達(dá)的試劑是攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒或其它藥學(xué)上可接受的載體。

在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述RPRM基因構(gòu)建在pCMV3載體上。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒是pCMV-HA-RPRM質(zhì)粒。

本發(fā)明還提供了一種放療增敏試劑盒，所述放療增敏試劑盒的活性成分包括攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，所述RPRM基因構(gòu)建在pCMV3載體上。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述攜帶RPRM基因的真核表達(dá)質(zhì)粒是pCMV-HA-RPRM質(zhì)粒。