[發(fā)明專利]一種基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811207218.9 | 申請日: | 2018-10-17 |
| 公開(公告)號(hào): | CN109439734B | 公開(公告)日: | 2022-01-28 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 涂景;蘇奧;馬靖原;黃夢婷;楊芳;陸祖宏 | 申請(專利權(quán))人: | 東南大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12Q1/6844 | 分類號(hào): | C12Q1/6844 |
| 代理公司: | 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
| 地址: | 211102 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 基于 瓊脂 凝膠 介質(zhì) 基因組 擴(kuò)增 方法 | ||
1.一種基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法,其特征在于,包括將多重鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)體系置于瓊脂糖凝膠中,采用具有鏈置換能力的核酸聚合酶和隨機(jī)序列引物,在恒溫的條件下,完成對目標(biāo)基因組的全基因組擴(kuò)增,提高其絕對質(zhì)量,所述瓊脂糖凝膠,是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠,具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),瓊脂糖的質(zhì)量體積比在0.5%-5.0%之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法,其特征在于,所述具有鏈置換能力的核酸聚合酶,是Φ29DNA聚合酶,Klenow DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法,其特征在于,所述隨機(jī)序列引物,其長度為5-40個(gè)堿基,其中包含一個(gè)或多個(gè)簡并堿基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法,其特征在于,所述隨機(jī)序列引物,為普通未修飾引物,或者為經(jīng)過硫代修飾、硫酸化修飾或氨基修飾的修飾引物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于瓊脂糖凝膠介質(zhì)的全基因組擴(kuò)增方法,其特征在于,所述目標(biāo)基因組,為一種或多種人類、動(dòng)物、植物或微生物的基因組,目標(biāo)基因組的規(guī)模,為單細(xì)胞基因組或多細(xì)胞基因組。
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