[發明專利]特異性結合CD19的全人源化抗體及應用

有效

• 申請號: 201811201166.4
• 申請日: 2018-10-16
• 公開（公告）號: CN109293774B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 高威;馬素娟;孫鸞;李娜;陳璐璐
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N5/10;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32297
• 代理人: 周海斌

本發明涉及特異性結合CD19的全人源化抗體及應用。該抗體至少具有重鏈CDR1、重鏈CDR2、重鏈CDR3、輕鏈CDR1、輕鏈CDR2、輕鏈CDR3之一。該抗體可用于制備細胞或偶聯物、診斷試劑盒、藥物或藥物組合物；該核酸用于制備特異性結合CD19的全人源化抗體、藥物或藥物組合物；該細胞或偶聯物用于制備藥物或藥物組合物；該藥物或藥物組合物具有針對CD19陽性腫瘤的抗腫瘤作用。本發明通過噬菌體展示技術篩選出抗CD19的全人源化抗體，該抗體特異性強，親和力高，能與CD19陽性細胞結合，且不會與現有抗體FMC63形成競爭結合關系，具有抗腫瘤應用前景。

技術領域

本發明涉及一種特異性結合CD19的全人源化抗體及應用，屬于生物技術領域。

背景技術

據發明人所知，CD19是特異性表達于人正常及惡變B細胞表面的跨膜蛋白，分子量約95kd。在B細胞譜系發育的各個階段均高表達CD19，但完全成熟的漿細胞丟失CD19的表達，是B細胞的重要標記。CD19在B細胞表面與CD21及CD81形成多分子復合體。在獲得激活信號后，位于CD19細胞內結構域上的6個酪氨酸殘基發生磷酸化，招募下游信號分子，放大BCR的活化信號。CD19基因敲除小鼠B細胞活化明顯減弱，同時對大多數抗原的抗體應答都受到顯著抑制。因此，CD19作為B細胞受體的共受體(co-receptor)發揮作用，通過降低BCR激活所需的信號閾值，調控B細胞的發育、增殖和分化^[1]。

CD19在B細胞上的廣泛表達使其成為B細胞惡性病變的重要治療靶點^[2]。在多種類型的B細胞白血病(包括急性B淋巴細胞白血病，慢性B淋巴細胞白血病)、B細胞淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和彌漫性大B細胞淋巴瘤)的治療中，CD19抗體、雙特異性抗體和抗體衍生物的抗腫瘤臨床前試驗和臨床實驗已經廣泛開展；尤其是由CD19抗體衍生的嵌合抗原受體T細胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)治療方法^[3]，已經有兩項獲得FDA批準上市^[4,5]，分別用于治療急性B淋巴細胞白血病和B淋巴瘤；其識別CD19的抗體為FMC63，是一種基于小鼠單克隆抗體的人源化抗體^[6]。故篩選新型CD19全人源化抗體，構建嵌合抗原受體T細胞用于B細胞惡性病變的治療，具有重要的臨床應用價值。

經檢索發現，申請號201711157376.3，申請公布號CN107827991A的中國發明專利申請，公開一種靶向CD19的嵌合抗原受體T細胞及其應用。以該技術方案為代表的現有技術中已經存在了一些抗CD19抗體。發明人課題組經系統地試驗研究后得出了不同于現有技術的特異性結合CD19的全人源化抗體。

發明內容

本發明的主要目的是：針對現有技術存在的問題，提供一種特異性結合CD19的全人源化抗體，能與CD19陽性細胞結合。

本發明解決其技術問題的技術方案如下：

一種特異性結合CD19的全人源化抗體，所述抗體包括重鏈和輕鏈；其特征是，所述抗體至少具有以下技術特征之一：

i、所述重鏈包括重鏈CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基26-33；

ii、所述重鏈包括重鏈CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基50-59；

iii、所述重鏈包括重鏈CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基100-103；

iv、所述輕鏈包括輕鏈CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基161-165；

v、所述輕鏈包括輕鏈CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基183-186；

vi、所述輕鏈包括輕鏈CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸殘基224-229。