[發明專利]與植物脂肪酸代謝相關的基因PfDGAT2、表達載體、構建方法及應用

有效

• 申請號: 201811195464.7
• 申請日: 2018-10-15
• 公開（公告）號: CN109266627B
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 王計平;周雅莉;任文燕;李潤植;安茜;段露露;郝月茹
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/81;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/50
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 李振瑞

1.一種基因PfDGAT2在特異性選擇α-亞麻酸分子中的應用，其特征在于，所述基因PfDGAT2的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，該基因與植物脂肪酸代謝相關。

2.根據權利要求1所述的基因PfDGAT2在特異性選擇α-亞麻酸分子中的應用，其特征在于，所述基因PfDGAT2用于制備酵母表達載體。

3.根據權利要求2所述的基因PfDGAT2在特異性選擇α-亞麻酸分子中的應用，其特征在于，所述的酵母表達載體按照以下步驟構建：

S1，目的基因擴增與純化：以連接了目的基因PfDGAT2的pMD18-T載體為模板，以SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6為引物對，進行PCR擴增，然后凝膠回收并純化目的基因，得到目的基因PfDGAT2片段，備用；

S2，分別將目的基因PfDGAT2和表達載體pYES2.0雙酶切，然后將雙酶切產物連接，得到含有基因PfDGAT2的酵母表達載體。

4.根據權利要求3所述的基因PfDGAT2在特異性選擇α-亞麻酸分子中的應用，其特征在于，S1中，目的基因PfDGAT2的雙酶切反應體系50μL如下：目的基因PfDGAT2片段20μL、10U/μL的Kpn I 1μL、10U/μL的BamH I 1μL、FD Buffer 5μL、ddH₂O補足至50μL；

表達載體pYES2.0雙酶切反應體系50μL如下：表達載體pYES2.0質粒1.5μg、10U/μL的Kpn I 1μL、10U/μL的BamH I 1μL、FD Buffer 10μL、ddH₂O補足至50μL。

5.根據權利要求2所述的基因PfDGAT2在特異性選擇α-亞麻酸分子中的應用，其特征在于，所述酵母表達載體用于構建酵母表達系統。