[發明專利]一種芯片的制備方法、DNA或蛋白質的固定方法和芯片

在審

• 申請號: 201811191589.2
• 申請日: 2018-10-12
• 公開（公告）號: CN109610006A
• 公開（公告）日: 2019-04-12
• 發明（設計）人: 高錦鴻;趙智;趙陸洋;王琦
• 申請（專利權）人: 深圳市瀚海基因生物科技有限公司
• 主分類號: C40B40/06
• 分類號: C40B40/06;C40B40/10;C12Q1/6837;G01N33/68
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 李小焦;彭愿潔

本申請公開了一種芯片的制備方法、DNA或蛋白質的固定方法和芯片。本申請的芯片制備方法，包括在固定處理之后進行弱鈍化處理；弱鈍化處理包括將含有催化劑的弱鈍化反應液與固定處理的芯片接觸，促進DNA或蛋白質與基底表面的結合，使DNA或蛋白質充分固定在基底表面。本申請的制備方法，在固定處理之后增加弱鈍化處理步驟，使DNA或蛋白質能夠更充分固定在基底表面，不僅提高了DNA或蛋白質固定的質量和效率，而且DNA或蛋白質的固定更充分，使得芯片上固定的DNA或蛋白質量與初始加入的DNA或蛋白質濃度關系更緊密，從而使得DNA或蛋白質固定的量高度可控，且重復性好，為制備高品質的可用DNA或蛋白質芯片奠定了基礎。

技術領域

本申請涉及芯片制備領域，特別是涉及一種芯片的制備方法、DNA或蛋白質的固定方法和芯片。

背景技術

DNA是包括人類在內的許多生物的重要遺傳物質，其中，包含了許多重要信息，能為生理檢測或病理檢測提供關鍵信息。高效準確地檢測DNA，特別是能定量地識別其中的堿基信息變化，不僅具有重大的科研意義，而且具有巨大的臨床應用價值。基于DNA芯片的識別檢測方法，相較于電泳檢測、PCR檢測或試紙法檢測等其他檢測手段，DNA芯片檢測具有檢測通量高、準確性好、檢測方便、無須專門測試人員等優點。DNA芯片是實現DNA芯片檢測的重要平臺，是檢測反應得以發生的基礎。制備DNA芯片，需要將DNA可靠、高效的固定在玻璃、硅片或聚合物襯底等基底上；并且，要求DNA固定方法具有較好的可重復性，能夠穩定、有效的生產出品質一致的DNA芯片。

DNA固定不可靠的DNA芯片容易出現以下缺陷：1)較低的檢出率；2)較高的假陽性或假陰性；3)給出錯誤的序列信息；4)DNA芯片檢測重復性差。綜合而言，以上缺陷會導致檢測成本高、檢測質量差等問題。因此，發展高效、便捷的DNA固定技術，提高制備方法的質量和可重復性，對于提高DNA芯片的可用性，降低其使用成本，具有重大的意義。

可用的DNA芯片需要滿足如下要求：1)DNA修飾均勻的分布在基底上；2)制得的芯片具有較低的非特異吸附信號；3)修飾的DNA種類可以定制，即可修飾不同種類的DNA鏈；4)DNA芯片的制備流程具有良好的重復性。

目前的DNA芯片制備方法中，常見的將DNA固定到基底的方式包括：1)共價鍵鏈接；2)物理吸附連接；3)特殊鏈接對連接，例如生物素與鏈霉親和素鏈接對。其中，共價鍵連接的方式由于連接強度高、DNA不易脫落等顯著優勢，得到了廣泛的應用。但是，作為一種活性的化學反應，共價鍵連接面臨反應的可控性、反應速度以及反應的可重復性等方面的諸多問題。因此，設計良好的芯片制備方法，對于提高DNA芯片質量具有重要的價值。

發明內容

本申請的目的是提供一種改進的DNA或蛋白質芯片的制備方法，DNA或蛋白質的固定方法，以及制備的DNA或蛋白質芯片。

本申請采用了以下技術方案：

本申請的一方面公開了一種DNA或蛋白質芯片的制備方法，包括在固定處理之后進行弱鈍化處理；弱鈍化處理包括將弱鈍化反應液與固定處理后的芯片接觸，促進DNA或蛋白質與芯片基底表面的結合，使DNA或蛋白質充分固定在基底表面；其中，弱鈍化反應液中含有催化劑，該催化劑能夠促進DNA或蛋白質與基底表面的結合，從而使DNA或蛋白質充分固定在基底表面。