[發明專利]嵌合抗原受體及其基因和重組表達載體、CD22-CD19雙靶向性的T細胞及其應用

有效

• 申請號: 201811190780.5
• 申請日: 2018-10-12
• 公開（公告）號: CN109678965B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 伍志強;韓為東;王瑤;代漢仁;賈鶴靜;王曉慧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N5/10;C12N15/867;A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 喬雪微;劉依云

本發明屬于腫瘤生物制品領域，具體地，涉及嵌合抗原受體及其基因和重組表達載體、CD22?CD19雙靶向性的T細胞及其應用。所述嵌合抗原受體為CD22ScFv?L?CD19ScFv?CD8?CD137?CD3ζ，包括依次串聯的CD22ScFv、連接肽L、CD19ScFv、CD8的鉸鏈區和跨膜區、CD137的胞內信號結構域和CD3ζ的胞內信號結構域。在治療B細胞系惡性血液系統腫瘤時，本發明的嵌合抗原受體修飾的T細胞不僅能夠特異性識別僅有其中CD19抗原或CD22抗原單個靶點表達的腫瘤細胞，而且還可以識別CD19抗原和CD22抗原兩個靶點共表達的腫瘤細胞，較單靶點CAR?T，雙靶點CAR?T具有更強的抗腫瘤活性，避免低豐度抗原表達的瘤細胞產生免疫逃逸，從而降低復發風險。

技術領域

本發明屬于腫瘤生物制品領域，具體地，涉及一種嵌合抗原受體及其基因和重組表達載體、CD22-CD19雙靶向性的T細胞及其應用。

背景技術

以急性淋巴細胞白血病、急性髓系白血病、非霍奇金淋巴瘤等為代表的血液系統惡性腫瘤在我國的發病率有不斷增高趨勢，并且以中青年為主要患病群體，嚴重威脅著我國人口的健康與生命。盡管以化療、放療、造血干細胞移植、以及分子靶向藥物與治療性抗體為主的治療手段在很大程度上提高了疾病的緩解率，延長了患者生存期，但20-50%的患者在緩解后復發，同時約有30%左右的患者對目前已有的誘導緩解手段存在原發性抵抗。針對這種情況，需要探索尋找新的有效治療策略。

CD19和CD22均在臨床水平被確認為表達在大多數B細胞惡性腫瘤的特異性抗原，而在造血干細胞、血漿細胞和其他正常組織中不表達。CD19和CD22抗原與B細胞的生物特性密切相關，存在于B細胞成熟的各個階段。在B細胞增殖和分化中起重要的調節作用。而且，CD19和CD22分子在細胞膜上比較暴露，容易接近，與單克隆抗體結合后無顯著內化及脫落，也不會因為與抗體的結合而發生抗原調變。因此CD19和CD22抗原是B細胞系血液系統腫瘤治療的理想靶點。

腫瘤免疫治療經過多年的臨床前探索與臨床研究在近年取得了令人矚目的突破性進展，尤其以PD-1抗體在治療實體瘤以及靶向CD19的嵌合抗原受體修飾T細胞（CAR?T）在治療B細胞系惡性血液系統腫瘤中獲得了顯著的臨床突破，包括B-ALL（B-cell?acutelymphoblastic?leukemia，B細胞急性淋巴細胞白血?。?，NHL（non-Hodgkins?lymphoma，非霍奇金淋巴瘤），B-CLL（B-cell?Chronic?lymphocytic?leukemia，B細胞慢性淋巴細胞白血病）。

盡管2013年以來全球公開報道的臨床數據顯示，針對CD19的CAR?T治療可以使60-90%的復發難治性B-ALL患者獲得再次緩解，約50%的復發難治性NHL患者獲得疾病控制與緩解，但同時也暴露出了一些迫切需要對該療法進行優化與解決的問題。從較長期臨床效果觀察方面來講，最為突出的問題是緩解之后的再次復發，如約40%左右的CD19-CAR?T治療緩解后的B-ALL患者在6個月后會再次復發。究其復發的原因，其中最為常見的原因為靶抗原CD19轉變為陰性或者其他表型。

不管哪一種情況的CD19-CAR?T后的復發，更換治療靶點的CAR?T細胞再輸注可能再次顯效，如近期有機構對CD19-CAR?T復發后患者改為CD22-CAR?T細胞輸注的初步臨床結果就證實了這一觀點。這一初步的臨床研究結果在指出“采用多靶點序貫性CAR?T細胞輸注治療策略”可能是克服單靶點CAR?T輸注策略存在高復發率問題的同時，也暗示性的指出了“雙靶點CAR?T輸注策略”可能是解決單靶點CAR?T細胞治療血液系統腫瘤不足之處的有效策略。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術中CAR?T對腫瘤治療過程中效率低和復發風險高的缺陷，提供一種嵌合抗原受體及其基因和重組表達載體、工程化CD19和CD22雙靶向性的T細胞及其制備方法和應用，嵌合抗原受體修飾的T細胞在治療B細胞系惡性血液系統腫瘤，具有更強的抗腫瘤活性，且治療后顯著降低復發風險。