[發明專利]一種乙醇-硫酸銨雙水相體系分離富集積雪草總苷的方法

在審

• 申請號: 201811183775.1
• 申請日: 2018-10-11
• 公開（公告）號: CN109568200A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 鐘曉明;朱云
• 申請（專利權）人: 浙江大學自貢創新中心
• 主分類號: A61K8/9789
• 分類號: A61K8/9789;A61Q19/02
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 忻明年

本發明公開了一種乙醇?硫酸銨雙水相體系分離富集積雪草總苷的方法。本發明包括：步驟1:積雪草曬干粉碎；步驟2：將積雪草粉末投入圓底燒瓶中，用70％乙醇溶劑，60℃水浴加熱回流提取2h，提取后過濾得到積雪草提取液；步驟3：將積雪草提取液進行真空濃縮，得到積雪草濃縮液；步驟4：利用雙水相體系的選擇性分離富集積雪草總苷；步驟5：按照體積比在積雪草總苷的樣品層中加入一定量的無水乙醇，震蕩，混勻，離心，取出離心液上層；步驟6：將上層減壓濃縮，真空干燥，最終得到積雪草總苷。本發明制得產品安全性高，提高了提取物純度，改善了其品質，有效降低其生產成本。

技術領域

本發明涉及植物提取的制備方法，特別是涉及一種乙醇-硫酸銨雙水相體系分離富集積雪草總苷的方法。

背景技術

積雪草為傘形科植物積雪草(Centella asiatica(L.)Urban)的干燥全草，廣泛分布于長江流域以南各地，全草入藥，常年可采，資源豐富，在許多國家的醫藥領域中應用己有幾千年歷史，其始載于《神農本草經》，列為中品，性寒，味苦，辛，具有清熱利濕、解毒消腫之功效，主要用于濕熱黃疽、中暑腹瀉、癰腫瘡毒、跌打損傷等。積雪草中的化學成分包括三萜皂苷、三萜酸、多炔烯類和揮發油等。現代研究證明，積雪草提取物可有效促進皮膚損傷、局部膠原合成代謝，并在皮膚損傷后的組織修復方面有中藥作用。近年來研究還發現，積雪草具有抗氧化、抗抑郁、保肝、抑制腫瘤細胞增生等作用。

積雪草苷等活性成分具有美白功效，其作為化妝品的功效成分而被廣泛使用。目前富集積雪草總苷的方法主要采用大孔樹脂方法純化，例如專利一種積雪草總苷的制備方法(201210071147.0)：以水提取，大活性炭脫色，大孔樹脂吸附-洗脫富集積雪草總苷，工藝流程復雜耗時，洗脫時產生大量溶劑導致濃縮時能耗較大。

發明內容

本發明解決的問題在于提供一種乙醇-硫酸銨雙水相體系分離富集積雪草總苷的方法，本方法工序少，成本低，耗時短，適合工業化大規模生產的需求。

本發明是通過以下技術方案來實現：

步驟1:積雪草曬干，粉碎至一定粒度制得積雪草粉末。

步驟2：將積雪草粉末投入圓底燒瓶中，用70％乙醇溶劑，60℃水浴加熱回流提取2h，提取后過濾，得到積雪草提取液。

步驟3：將積雪草提取液進行真空濃縮，得到積雪草濃縮液。

步驟4：利用雙水相體系的選擇性分離富集積雪草總苷：將步驟3中的積雪草濃縮液配置成密度為1.00～1.5g/ml的積雪草水溶液。取一定體積的積雪草水溶液加入到雙水相體系中，震蕩搖勻后靜置，離心，分離上下相即含有積雪草總苷的上層及含有蛋白質、多糖等雜質的下層，取出含有積雪草總苷的樣品層。

所述的雙水相體系由乙醇、硫酸銨和蒸餾水組成；

所述雙水相體系中，乙醇的體積分數為15～85％，硫酸銨的質量分數為5～45％。

步驟5：按照體積比在積雪草總苷的樣品層中加入一定量的無水乙醇，震蕩，混勻，離心，取出離心液上層。

步驟6：將上層減壓濃縮，真空干燥，得到最終產品。

作為優選，所述步驟1具體為，積雪草粉碎至20～50目

作為優選，所述步驟2具體為，積雪草粉末與70％乙醇溶劑的料液比為1：5，提取次數為2次。

作為優選，所述步驟3具體為，濃縮溫度為65℃。

作為優選，所述步驟4具體為，離心轉速為4000r/min，離心10min。

作為優選，所述步驟4具體為，雙水相體系的配置過程：將硫酸銨用蒸餾水溶解后，加入無水乙醇，充分攪拌混勻。