[發明專利]一種抗CA50的抗體及其應用

有效

• 申請號: 201811183023.5
• 申請日: 2018-10-10
• 公開（公告）號: CN111018991B
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發明（設計）人: 孟媛;鐘冬梅;游輝;范凌云
• 申請（專利權）人: 東莞市朋志生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/30
• 分類號: C07K16/30;C12N15/13;C12N15/85;G01N33/574
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李青

本發明涉及一種新穎的包含CA50抗原結合結構域的分離的結合蛋白，并對該結合蛋白的制備、應用等方面進行研究。所述結合蛋白活性強，與人CA50具有很高的親和力，可廣泛應用于CA50的檢測領域。

技術領域

本發明涉及生物技術和醫學技術領域，尤其是涉及一種抗CA50的抗體及其應用。

背景技術

CA50是一種非特異性的廣譜腫瘤標志物(Tumor Marker)。是一種唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，是反映腫瘤存在的化學類物質。它們或不存在于正常成人組織而僅見于胚胎組織，或在腫瘤組織中的含量大大超過在正常組織里的含量，它們的存在或量變可以提示腫瘤的性質，借以了解腫瘤的組織發生、細胞分化、細胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預后判斷以及治療指導。

CA50是一種唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，正常組織中一般不存在,但CA50廣泛分布于結腸、直腸、肺、胰、膽囊、子宮和肝等多種腫瘤組織中。癌癥時因癌細胞糖酵解不完全和酸性產物堆積，使CA50產生過多，釋放于血液中。消化道腫瘤時血清CA50濃度升高最多見，尤其以胰腺癌和膽囊癌陽性率最高，在80％以上，結腸癌和直腸癌為60％～70％，肝癌時也為60％～70％，肺癌為60％，對肺癌的鑒別診斷優CEA，在潰瘍性腸炎、肺炎、胃炎時CEA均可升高，而CA50無此現象。卵巢癌、肺癌、子宮頸癌、乳腺癌患者血清CA50濃度也可升高。癌癥患者血清CA50值與病程進展相關，CA50值越高，預后越差。惡性胸、腹腔積液中CA50陽性率很高，良性胸腔積液中極少陽性，提示用胸、腹腔積液進行鑒別診斷比血清更有意義。慢性胰腺炎、結腸炎、膽囊炎和肺炎時也有CA50量升高，但隨著炎癥消除而下降。肝硬化時CA50陽性率達50％，肝炎25％，未透析的腎功能不全患者約37％陽性，應引起臨床注意。CA50與CA19-9相關性極高，因此CA50檢測對消化道腫瘤診斷價值與CA19-9相似，但部分Lewisab的結腸癌、胰腺癌患者CA19-9檢測陰性時，CA50可為陽性。

CA50(CA50)是一種非特異性的廣譜腫瘤標志物，與癌抗原19-9有一定的交叉抗原性，主要用于胰腺癌、結腸/直腸癌、胃癌的輔助診斷，其中胰腺癌病人增高最明顯。

CA50目前常用免疫檢測法檢測，都需要用到針對CA50的單克隆抗體，而目前國內用于檢測CA50的單克隆抗體原料極少，且靈敏度、特異性上都存在缺陷，還有較大的改善空間。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明涉及一種新穎的包含CA50抗原結合結構域的分離的結合蛋白，靈敏度和特異性相較之現有的CA50的單克隆抗體都有明顯優勢，本發明還對該結合蛋白的制備、應用等方面進行研究。

所述抗原結合結構域包括選自下述氨基酸序列的至少一個互補決定區，或與下述氨基酸序列的互補決定區具有至少80％的序列同一性且與CA50具有K_D≤8.75×10^-8mol/L的親和力；

互補決定區CDR-VH1為G-X1-T-F-X2-D-A-X3-M-D，其中，

X1是I、V或L，X2是S或T，X3是F或M；

互補決定區CDR-VH2為I-G-X1-N-G-N-X2-H-A-T-Y-X3-A-E-S-V，其中，

X1是Q或N，X2是D、E或N，X3是Y、F或W；

互補決定區CDR-VH3為T-X1-R-F-X2-Y，其中，

X1是I、L或V，X2是P或A；

互補決定區CDR-VL1為Q-X1-X2-N-S-Y-X3-S，其中，

X1是E或D，X2是L或I，X3是I或L；

互補決定區CDR-VL2為R-X1-K-X2-L-X3-D，其中，