[發(fā)明專利]一種提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811177600.X
• 申請日: 2018-10-10
• 公開（公告）號: CN109095623B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梁曉聲
• 申請（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C02F101/16
• 代理公司: 武漢華旭知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 42214
• 代理人: 劉天鈺

1.一種提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于采用以下方法制備：

(1)、分別配置Na₂CO₃溶液和CaCl₂溶液；

(2)、在Na₂CO₃溶液中加入聚丙烯酸溶液并攪拌，得到混合溶液A，在CaCl₂溶液中加入聚丙烯酸溶液并攪拌，得到混合溶液B；

(3)、在混合溶液A中加入十二烷基硫酸鈉溶液，制得混合溶液C，混合溶液C中十二烷基硫酸鈉的濃度為5～30mM，然后在攪拌條件下將混合溶液B倒入混合溶液C中進行反應(yīng)，反應(yīng)體系中CO₃^2-離子與Ca²⁺離子的摩爾比為1：2～2:1，在30～90℃、維持?jǐn)嚢璧臈l件下進行反應(yīng)至反應(yīng)結(jié)束，反應(yīng)結(jié)束后生成沉淀；

(4)、將反應(yīng)產(chǎn)物過濾并洗滌后真空干燥，制得碳酸鈣納米顆粒；

(5)、將殼聚糖溶液溶解于醋酸溶液中，繼續(xù)加入上步驟中的碳酸鈣納米顆粒、2-5倍體積食用油、司班-80后攪拌，所加入的殼聚糖、碳酸鈣納米顆粒及司班-80的質(zhì)量比為1～5：0.5～5：0.5～5；

再加入京尼平至其終濃度為5～50mM，持續(xù)攪拌；或者加入戊二醛溶液，攪拌后繼續(xù)加入硼氫化鹽或乙?；饸浠}繼續(xù)反應(yīng)，所述碳酸鈣納米顆粒、戊二醛溶液、硼氫化鹽或乙酰基硼氫化鹽之間的質(zhì)量比為0.5～5：0.2～2：0.5～5；

將沉淀離心分離后并清洗，用丙酮脫水并晾干后，制得微黃色粉末，即為包埋了碳酸鈣的殼聚糖微載體；

(6)、將上步驟中包埋了碳酸鈣的殼聚糖微載體混懸于水中，逐滴加入至海藻酸鈉溶液中，攪拌，離心分離沉淀后清洗，再將沉淀放入質(zhì)量濃度1～10％鹽酸溶液中浸泡處理，處理完畢后離心分離并清洗，離心分離沉淀，最后用丙酮脫水并在室溫下晾干，得表面電荷改性的殼聚糖微載體，即為提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(1)中Na₂CO₃溶液、CaCl₂溶液的濃度均為0.1mol/L，且兩者的體積相同。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(2)中聚丙烯酸溶液的濃度為0.3～3g/L，所加入的聚丙烯酸溶液與Na₂CO₃溶液的體積比以及與CaCl₂溶液的體積比均為1:8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(3)中攪拌速度為200r/min，反應(yīng)時間為1h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(4)中將反應(yīng)產(chǎn)物過濾后用去離子水和無水乙醇各洗滌2次后，放入80℃的真空干燥箱中干燥24h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(5)中殼聚糖-醋酸溶液中醋酸的體積濃度為1％；殼聚糖的濃度為10～50g/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(5)中加入京尼平后持續(xù)攪拌24小時；或者加入戊二醛溶液后持續(xù)攪拌2小時，再加入硼氫化鹽/乙?；饸浠}后繼續(xù)反應(yīng)2小時。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(5)中硼氫化鹽或乙?；饸浠}具體為硼氫化鈉、硼氫化鉀、硼氫化鋰或乙酰基硼氫化鈉。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高好氧硝化菌及亞硝化菌培養(yǎng)密度的微載體，其特征在于：步驟(6)中將沉淀放入鹽酸溶液中浸泡處理15分鐘。