[發(fā)明專利]一種特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T、表達(dá)載體和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811171572.0
• 申請日: 2018-10-09
• 公開（公告）號: CN109251928B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖月華;陳忠;張悅;嚴(yán)倩;張正圣;裴炎;羅明
• 申請（專利權(quán)）人: 西南大學(xué)
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/60
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 劉奇

本發(fā)明提供了特異性表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，所述啟動子pGh3622T具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本發(fā)明提供的啟動子pGh3622T能夠?qū)Ｒ坏卦诿藁ù紊诤铣善诘睦w維中啟動下游基因表達(dá)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T、表達(dá)載體和應(yīng)用。

背景技術(shù)

棉花是世界上最重要的天然纖維作物，棉纖維占世界紡織原料的40～50％。棉花生產(chǎn)和紡織加工在我國國民經(jīng)濟(jì)中占有舉足輕重的地位。棉花纖維是由棉花外珠被表皮細(xì)胞經(jīng)起始、伸長、次生壁合成和成熟四個過程發(fā)育而成的單細(xì)胞纖維。棉花纖維伸長期和次生壁合成期是決定纖維產(chǎn)量和品質(zhì)的重要發(fā)育時期。纖維伸長期從開花當(dāng)天纖維細(xì)胞突出胚珠外表皮開始，持續(xù)到開花后約25天。纖維伸長持續(xù)時間和伸長速率決定最終棉花纖維的長度。同時伸長期纖維初生壁的周長決定了纖維的最終細(xì)度。棉花纖維次生壁合成期跨越開花后15～45天，纖維次生壁合成期的起始一定程度上決定了纖維伸長的持續(xù)時間，從而影響了棉花纖維的最終長度。此期間合成和沉積的纖維素超過成熟纖維干重的90％。纖維素沉積的多少直接決定了成熟纖維的細(xì)胞壁厚度，是馬克隆值的重要決定因素，而纖維素含量水平、分子聚合度、微纖絲的結(jié)晶度和排列方向均是纖維強(qiáng)度的重要影響因素。

由于棉花可利用的遺傳基礎(chǔ)狹窄，傳統(tǒng)育種改良棉花纖維的產(chǎn)量和品質(zhì)難以取得大的突破。隨著棉花遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)的成熟和分子生物學(xué)研究的深入，基因工程技術(shù)越來越成為產(chǎn)量和品質(zhì)改良的重要手段。纖維特異表達(dá)啟動子可以控制下游基因在棉花纖維中特異或優(yōu)勢表達(dá)，是實(shí)現(xiàn)基因工程調(diào)控纖維發(fā)育的重要工具。前人已報道一批纖維特異表達(dá)啟動子，并大部分獲得了專利保護(hù)。但總體看，這些啟動子主要是纖維伸長期特異表達(dá)的，少數(shù)次生壁合成期特異表達(dá)啟動子(如FbLate2)缺乏嚴(yán)格的組織專一性，其下游可能在其他組織(如莖)中也有部分表達(dá)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T，能夠?qū)Ｒ坏脑诿藁ù紊诤铣善诘睦w維中啟動下游基因的表達(dá)。

本發(fā)明提供了一種特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T，所述啟動子pGh3622T具有SEQ IDNo.1所示的核苷酸序列。

本發(fā)明還提供了含有上述技術(shù)方案所述的啟動子pGh3622T的表達(dá)載體，所述表達(dá)載體包括上述技術(shù)方案所述啟動子pGh3622T。

優(yōu)選的，所述表達(dá)載體為在質(zhì)粒pBI121中插入上述技術(shù)方案所述啟動子pGh3622T構(gòu)建而成。

本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述的啟動子pGh3622T在棉花纖維發(fā)育轉(zhuǎn)基因調(diào)控中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述的啟動子pGh3622T在棉花產(chǎn)量品質(zhì)基因工程改良中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述的表達(dá)載體在棉花纖維發(fā)育轉(zhuǎn)基因調(diào)控中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述的表達(dá)載體在棉花產(chǎn)量品質(zhì)基因工程改良中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供的特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T，能夠?qū)Ｒ坏脑诿藁ù紊诤铣善诘睦w維中啟動下游基因的表達(dá)。

本發(fā)明實(shí)施例的結(jié)果顯示：本發(fā)明提供的特異表達(dá)下游基因的啟動子pGh3622T，能夠?qū)Ｒ坏脑诿藁ù紊诤铣善诘睦w維中啟動下游基因的表達(dá)。

附圖說明

圖1為Gh3622基因在不同棉花組織中的表達(dá)，其中F10-30為開花后10-30天的纖維；

圖2為pGh3622T-GUS融合載體的構(gòu)建流程；

圖3為pBI121-pGh3622T轉(zhuǎn)基因棉花不同棉花組織的GUS染色結(jié)果；