[發(fā)明專利]一株高產(chǎn)蛋白酶的巴布維紅酵母

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811170296.6
• 申請(qǐng)日: 2018-09-27
• 公開（公告）號(hào): CN109182154B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 儲(chǔ)衛(wèi)華;周淑鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)藥科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/16
• 分類號(hào): C12N1/16;C12N9/60;C12R1/645
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開了一株高產(chǎn)蛋白酶的巴布維紅酵母，所述菌株的分類命名為巴布維紅酵母(Rhodotorula babjevae)RY1801，該菌株已在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局指定的保藏單位保藏，保藏日期為2018年6月21日，保藏單位名稱：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號(hào)為CGMCC NO.15980。本發(fā)明從中國(guó)黃海南部沿海淤泥中分離篩選出高產(chǎn)蛋白酶的巴布維紅酵母RY1801，20℃，200r/min發(fā)酵培養(yǎng)48h后，菌種生物量達(dá)到70.36g/L，酶活為9.653U/ml，這為動(dòng)物益生菌的開發(fā)提供了一種新型微生物菌株。

所屬技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開了一株高產(chǎn)蛋白酶的巴布維紅酵母，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

紅酵母是一類抗逆性較強(qiáng)的腐生菌的單細(xì)胞真核生物，在海水和淡水等營(yíng)養(yǎng)相對(duì)匱乏的 水體環(huán)境的水生酵母菌中，紅酵母約占50％。紅酵母細(xì)胞內(nèi)富含類胡蘿卜素和油脂等生物活 性成分，具有較高的生長(zhǎng)速率和較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性。由于其菌體能產(chǎn)生蝦青素等類胡蘿卜素 物質(zhì)，所以菌體通常呈黃色至深紅色顏色。紅酵母在天然類胡蘿卜素生物合成、微生物油脂 生產(chǎn)、全細(xì)胞生物催化、果蔬采后生物防治和功能飼料開發(fā)等領(lǐng)域的研究和應(yīng)用。

蛋白酶廣泛存在于動(dòng)物的內(nèi)臟、植物的莖葉果實(shí)以及微生物中，在分子生物學(xué)與微生物 發(fā)酵技術(shù)得到快速發(fā)展的今天，微生物蛋白酶在工業(yè)上的應(yīng)用十分普遍。微生物蛋白酶是利 用細(xì)菌、酵母、霉菌或者放線菌等一些微生物發(fā)酵獲得的酶。微生物蛋白酶又可以根據(jù)其適 應(yīng)環(huán)境的差異性分為適應(yīng)極端條件的蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、嗜鹽蛋白酶及酸性 蛋白酶，除此之外，還包括一些具有其他功能特性的蛋白酶。隨著基因工程、發(fā)酵技術(shù)的發(fā) 展和新型發(fā)酵設(shè)備的研發(fā)和廣泛應(yīng)用，微生物發(fā)酵逐漸成為工業(yè)酶制劑的核心來(lái)源。因此， 尋找新型高產(chǎn)蛋白酶微生物菌株具有重要意義。紅酵母細(xì)胞內(nèi)富含類胡蘿卜素，其細(xì)胞壁含 有葡聚糖，能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，產(chǎn)蛋白酶紅酵母在動(dòng)物生長(zhǎng)中使用，能夠促進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化 率，增強(qiáng)動(dòng)物的抗病能力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是公開一株巴布維紅酵母，可高產(chǎn)蛋白酶，為促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化以及 提高機(jī)體抗病能力益生菌開發(fā)提供新型可選菌株。

本發(fā)明所述菌株巴布維紅酵母(Rhodotorula babjevae)RY1801是由發(fā)明人從中國(guó)黃海南 部沿海淤泥中篩選分離純化獲得，已保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2018年6月21日， 保藏編號(hào)為CGMCC NO.15980。本發(fā)明的巴布維紅酵母RY1801菌落為圓形，濕潤(rùn)，易挑起， 邊緣整齊，表面光滑，比細(xì)菌的菌落大而厚，呈明顯的紅色或橘黃色。

本發(fā)明的巴布維紅酵母(Rhodotorula babjevae)RY1801通過(guò)ITS區(qū)域序列比對(duì)分析鑒定， 與巴布維紅酵母親緣關(guān)系最為接近，ITS序列同源性為99％，利用MEGA 7軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā) 育樹，RY1801與Rhodotorula babjevae culture CBS：322、Rhodotorula babjevaestrain YS3為同 一分支，根據(jù)RY1801菌株形態(tài)特征以及ITS基因序列比對(duì)結(jié)果，確定RY1801為巴布維紅酵 母(Rhodotorula babjevae)，命名為巴布維紅酵母RY1801。

本發(fā)明的巴布維紅酵母(Rhodotorula babjevae)RY1801能夠高產(chǎn)蛋白酶，在YPD液體培 養(yǎng)基中20℃，200r/min發(fā)酵培養(yǎng)48h后，菌種生物量達(dá)到70.36g/L，酶活為9.653U/ml。

本發(fā)明所述菌株巴布維紅酵母(Rhodotorula babjevae)RY1801屬于紅酵母屬(Rhodotorula)，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2018年6月21日，保藏編號(hào)為CGMCCNO.15980。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。