[發明專利]山葵中天然異硫氰酸酯成分的精制方法及應用

在審

• 申請號: 201811159306.6
• 申請日: 2018-09-30
• 公開（公告）號: CN109394817A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 太志剛;宋慶和;劉金;李倩
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: A61K36/31
• 分類號: A61K36/31;A61K9/20;A61K47/10;A61K9/50;A61P31/04;A61P31/10
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本發明公開了一種山葵中天然異硫氰酸酯成分的精制方法；該方法將洗凈的整株山葵經過鹽析處理，采取常溫壓榨法直接對鹽析處理后的物料進行擠壓處理，將擠壓后的壓榨液和殘渣合并作為物料，在弱酸低溫條件下進行水解反應，冷卻至室溫，反應物用其等體積的乙醚萃取3?4次，合并乙醚萃取相，減壓蒸餾回收乙醚，得到天然異硫氰酸酯粗成分；利用分子蒸餾技術除去天然異硫氰酸酯粗成分中殘留的乙醚，得到天然異硫氰酸酯精制品，本發明方法使山葵根和莖葉中異硫氰酸酯成分的提取得率最高可達0.54%和0.36%；將所得天然異硫氰酸酯精品制成口腔崩解片；與空白對照比較，天然異硫氰酸酯口腔崩解片對白色念珠菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌均具有顯著的抑制作用(P＜0.01或P＜0.05)。

技術領域

本發明涉及一種從山葵中精制天然異氰酸酯成分的精制方法及應用。

背景技術

山葵又名山崳菜（Eutrema yunnanense），十字花科山崳菜年生草本植物。山葵中含有豐富的氨基酸、維生素及多種微量元素，是傳統調味品及蔬菜香辛料植物，被譽為“綠色黃金”。山葵中的硫葡糖苷在黑芥子苷酶的作用下發生酶促水解反應，釋放出一種淡黃色油狀、透明、易揮發的異硫氰酸酯混合成分（其結構式見式），由此使得山葵產生獨特的辛辣風味。

異硫氰酸酯成分的骨架為-N=C=S，取代基R多為烴基類，骨架上的C有高親電性，能夠與親核試劑（如氨基、硫醇、羰基、羧酸等）發生親核加成反應，因此能與水和醇等分子發生反應，其熱穩定性不高。近年來的藥理研究表明，異硫氰酸酯成分能阻止食物中多種致癌物，如多環芳烴、雜環胺和亞硝酸胺等引起的DNA損傷所引發的癌癥，能加速以上致癌物的排泄，還具有殺菌、抗氧化美白、消滅消化道寄生蟲、增進食欲等作用。

基于異硫氰酸酯具有較高的藥用價值，前人提出了多種提取策略及其應用方法，其中，山葵中天然異硫氰酸酯提取策略包括蒸餾提取法、溶劑提取法、超臨界流體提取和超聲輔助提取法；①胡尚勤等人利用水蒸氣蒸餾法提取了山葵中的異硫氰酸酯，水蒸汽蒸餾法具有操作簡便和成本低的特點，但水蒸氣蒸餾的能耗較大，操作溫度高。②杜喜玲等人報道，將山葵中的硫葡糖苷與黑芥子苷酶充分進行酶促水解反應，生成異硫氰酸酯；之后，采用有機溶劑進行提取，如二氯甲烷、乙醚及丙酮類等，將所生成的異硫氰酸酯成分萃取出來，得到異硫氰酸酯成分，該方法具有經濟節省的優點。③彭超在《山葵和芥子中異硫氰酸酯的抑菌活性成分與微膠囊研究》一文中將乙醇作為夾帶劑添加到二氧化碳超臨界流體中，成功提取到了異硫氰酸酯，稍改變超臨界流體壓力即可得到異硫氰酸酯，操作簡便，產品品質高，但超臨界裝置價格昂貴。④彭超同時在該文中還利用超聲提取異硫氰酸酯，縮短了提取時間，增加了提取得率，但所得異硫氰酸酯成分殘留了少量溶劑，產品品質不高。

發明內容

本發明克服現有技術中的不足，在考慮可行性和有效性的前提下，提供了一種從山葵中精制天然異硫氰酸酯成分的精制方法；首先將洗凈的整株山葵經過鹽析處理，采取常溫壓榨法對鹽析處理后的山葵不同的部位進行擠壓處理，使其山葵胞內外的硫葡糖苷完全釋放出來，將擠壓后的壓榨液和殘渣合并作為物料，然后在弱酸低溫條件下進行水解反應，使硫葡糖苷和黑芥子苷酶充分發生作用，最終生成天然異硫氰酸酯成分，然后迅速冷卻至室溫，反應物用其等體積的乙醚萃取3-4次，以乙醚萃取異硫氰酸酯成分，收集合并乙醚萃取相，減壓蒸餾回收乙醚，得到異硫氰酸酯粗成分，通過分子蒸餾技術除去異硫氰酸酯粗品中的微量乙醚，得到天然異硫氰酸酯精品。

本發明方法的具體步驟如下：

（1）將整株山葵采收后，洗凈，將山葵根和莖葉分別切為2-5cm大小的塊狀物,使用質量濃度2-5%的食鹽水浸泡5-8h，料液比為1-1.5（g:mL），然后在常溫下壓榨鹽析處理后的混合物，最終得到壓榨液和殘渣；以上通過鹽浸和常溫壓榨，使得山葵胞內外的硫葡糖苷得以完全釋放，且在常溫下操作，保持了硫葡糖苷的天然風味；