[發明專利]一種長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法

有效

• 申請號: 201811159222.2
• 申請日: 2018-09-30
• 公開（公告）號: CN109115743B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 鐘克利;湯立軍;曲秀莉;侯淑華;任歡歡;朱文慧;李秋瑩;徐永霞;鄧隆隆
• 申請（專利權）人: 渤海大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 錦州遼西專利事務所(普通合伙) 21225
• 代理人: 王佳佳

1.一種長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：是以熒光探針L，作為熒光成像檢測細胞中微量Al³⁺的熒光成像探針，通過長波發射熒光成像檢測細胞中微量Al³⁺，所述長波波長為608nm-650nm，所述熒光探針L的化學結構式為：

2.根據權利要求1所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：長波發射波長為608nm-650nm，熒光成像檢測細胞中微量Al³⁺時，先用5μmol/L-10μmol/L的熒光探針L溶液與細胞培養使熒光探針L進入活性細胞內，再將有熒光探針L的活性細胞與Al³⁺培養，使探針與Al³⁺在活性細胞內反應生成能發射特征波長熒光的化合物，實現探針對活性細胞內Al³⁺離子染色成像，用激光共聚焦熒光顯微鏡觀測培養后的活性細胞熒光圖像。

3.根據權利要求2所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：熒光探針L溶液的溶劑為PBS緩沖液，所述長波波長為608nm-650nm。

4.根據權利要求2所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：用激光共聚焦熒光顯微鏡觀測培養后的活性細胞熒光圖像，在488nm波長激發下，用630nm-650nm通道觀察，如果出現紅色熒光，則存在Al³⁺。

5.根據權利要求2所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：所述的活性細胞是海拉細胞，所述長波波長為608nm-650nm。

6.根據權利要求1所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：所述長波波長為608nm-650nm，熒光探針L，其具體合成方式如下：

以乙醇為溶劑，原料1,4-二乙基-7-羥基四氫喹喔啉-6-甲醛和水楊苯甲酰肼按照摩爾比1:1～1:3進行投料，加熱回流反應8h～12h，反應結束后有黃色固體析出，用乙醇進行重結晶，得到熒光探針L。

7.根據權利要求1所述的長波發射熒光成像檢測細胞中鋁離子的方法，其特征是：所述熒光探針L還可以在含水溶劑中熒光檢測Al³⁺，識別Al³⁺的溶劑是體積比為7:3的DMSO與Tris緩沖溶液，識別Al³⁺的溶劑的pH＝4～10，所述長波波長為608nm-650nm。